牛 英，刘冰浩，范七君，陈传武，娄兵海，蒋海兰

(广西柑桔育种与栽培工程技术研究中心/广西特色作物研究院，广西桂林,541004)

细胞是构成植物体的基本单位，也是植物体生命活动的基本单位，来源相同、结构相似、功能相同、彼此密切联系的细胞群构成功能组织[1]。植物组织细胞形态随植物种类[2-4]、生长环境[5-7]、逆境胁迫[8-10]等不同而异，因此植物组织细胞形态学观察是植物系统分类、遗传演化、抗逆反应等的主要研究方法之一。自然界中荧光现象极为普遍，许多物质被短波谱线照射后发出荧光，这种现象称为物质的自发荧光现象；还有一些物质只有和某种荧光物质结合后才能激发出荧光，这种现象称为物质的诱发荧光现象[11]。荧光显微技术是利用特定波长的光照射被检物体产生荧光进行检测的显微光学观测技术。不同组织细胞理化性质不同，在不同波长的照射下会产生不同颜色或不同强弱的荧光，使用荧光显微镜可以观察到植物组织、细胞在普通光学显微镜下无法呈现的一些特征，有助于更有效地进行观察和鉴别[12-13]。

用于显微观察的切片方法一般为石蜡切片、冷冻切片和徒手切片3种。石蜡切片是显微观察的常规方法，但切片前的脱水、透明、渗蜡、包埋等处理过程复杂冗长[14-15]。冷冻切片不需要脱水、透明等步骤，具有快速、简便、环保、易操作的特点[16-17]。与石蜡切片和冷冻切片相比，徒手切片显微效果较差，但操作更为简单，且不需要切片机等贵重仪器，可以很大程度上降低试验条件，提高工作效率，减少工作量[18-19]。……