黄爱军，顾佩佩，胡 燕，丁 敏，王 莹

(1 赣南师范大学生命科学学院，江西赣州，341000；2 国家脐橙工程技术研究中心，江西赣州，341000；3 江西省赣州市果业局，江西赣州，341000)

柑桔黄龙病(Citrus Huanglongbing, HLB)是当今柑桔生产中最具毁灭性的病害，可以为害柑桔类所有栽培品种[1]。在我国，HLB主要由韧皮部杆菌亚洲种(CandidatusLiberibacter asiaticus, CLas)引起。柑桔植株一旦感病，果实品质和产量均会受到严重影响，幼树一般在发病后2～3年内死亡，成年树一般在5～8年内死亡或丧失经济价值。目前，只能通过砍除田间病树、种植无病毒苗木和防控田间媒介昆虫的方式控制黄龙病的蔓延。

柑桔木虱是HLB田间最主要传播介体昆虫。一个园区一旦监测到带病柑桔木虱，一般在半年到3年时间内，会检测到带病植株，随后逐渐扩散到全园[2]。柑桔木虱以持久型方式传播CLas，黄龙病菌可在柑桔木虱体内增殖，一旦带毒终身传毒[3]。因此，在HLB防控过程中，有必需对单头柑桔木虱中的黄龙病菌进行监测。目前，有多种方法可检测单头柑桔木虱中的黄龙病菌，但所需时间较长，且需要核酸扩增仪器等设备[4-6]，难以普及推广到基层病害防控部门。核酸环介导等温扩增技术(Loop mediated isothermal amplification, LAMP)是一种快捷、灵敏的恒温扩增技术，降低了对于仪器的要求，适宜基层部门使用。目前已建立了针对病原菌外膜蛋白基因、16S rDNA基因、假定蛋白基因的柑桔黄龙病LAMP检测方法，检测极限可达1 pg/μL[7-10]。DNA模板的提取也是检测环节中耗时较多的一个环节。有研究结果显示，采用Direct-PCR制样法即通过组织裂解提取样品粗核酸用于后续检测，大大缩短了检测过程[11]。……