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基于CRISPR/Cas9技术的Wip1基因敲除ST细胞的建立

2021-11-04车晶晶张秀玲向光明刘志国牟玉莲

畜牧兽医学报 2021年10期
关键词:效率

车晶晶,徐 奎,张秀玲,向光明,王 楠,王 悦,刘志国,牟玉莲,李 奎

(中国农业科学院北京畜牧兽医研究所,北京 100193)

公猪繁殖能力直接影响母猪受胎率,同时也极大地影响后代仔猪与育肥猪的生长性能。睾丸作为雄性动物的主要生殖器官,其功能受“下丘脑-垂体-睾丸轴”调控,内含间质细胞、支持细胞、生精细胞和管周肌样细胞[1]。睾丸支持细胞分布在睾丸生精小管基底部,与生精细胞构成生精小管壁[2]。生精细胞在生精小管内规律、持续地产生精子,精子的正常发育等生理过程均需生精细胞与周边支持细胞的密切配合。支持细胞能够为生精细胞提供营养物质,促使精原干细胞分化,进而密切调控精子的发生过程[3-4]。生精细胞通过凋亡使其数量与支持细胞保持一定的比例,从而确保其能得到充分的营养,保持正常的生殖功能,即支持细胞的数量和功能控制着生精细胞的数量[5]。同时,支持细胞能通过调节生殖细胞的发育直接影响胚胎睾丸的形成和精子发生,从而控制着睾丸的大小和生精量[6-7]。猪睾丸(swine testis,ST)细胞是从猪胚胎(80~90日龄)睾丸组织中分离出的未成熟支持细胞,已被用于睾丸发育机制、猪病毒特征及致病性等方面的研究[8-10]。每个成熟的支持细胞只能维持一定数量的生殖细胞进行精子发生过程,且它的数量在体成熟之前就已经确定,只有未成熟的支持细胞(ST细胞)才会增殖,因此ST细胞对精子的发生至关重要[11]。

野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase l)是一种丝/苏氨酸磷酸酶,由Ppm1d(protein phosphatase,Mg2+/Mn2+depen-dent 1 delta)基因编码[12],位于猪的12号染色体上。……

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