猪圆环病毒3型Cap蛋白的原核表达
2021-11-04王帅勇朱世强虞凌雪刘晓敏单同领周艳君李国新童光志
王帅勇,汪 琪,朱世强,姚 云,虞凌雪,刘晓敏,单同领,郑 浩,周艳君,童 武,李国新,高 飞,童光志,于 海
(中国农业科学院上海兽医研究所,上海 200241)
猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科圆环病毒属,是一种单股环状DNA病毒。之前的研究发现猪圆环病毒分为PCV1和PCV2两个基因型,PCV1是由Tischer等[1]在1974年发现并被认为是一种细胞污染物,对猪群没有致病性;PCV2最早是由Clark等[2]在1991年于加拿大被发现的,对猪群有较强的致病性。很多研究表明PCV2是猪圆环病毒相关疾病(porcine circovirus associated diseases,PCVAD)的主要病原,能够引起猪的多种疾病,主要包括:断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisytemic wasting syndrome,PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(porcine dermatitis and nephropathy syndrome,PDNS)、猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)以及仔猪震颤(congenital tremors,CT),给养猪业造成了非常严重的经济损失[3-4]。
2016年,Palinski等[5]首次在美国发现新的PCV基因型并命名为猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3),该病毒能够引起多种猪病,与PCVAD非常相似。PCV3的基因组全长为2000 bp,主要包括3个开放性阅读框(opening reading frame,ORF),其中ORF1主要编码Rep蛋白,与病毒的复制相关,ORF2主要编码Cap蛋白,该蛋白是病毒的唯一结构蛋白,与病毒的感染和免疫有较强的相关性。
目前为止,已经有多个国家都有关于PCV3的报道,包括中国、巴西、德国、意大利和俄罗斯等[6-10]。通过PCV3在中国不同地区流行情况的报道可以看出,PCV3已经广泛存在于中国的猪群当中,本实验室在之前的流行病学调查过程当中检测到了PCV3的阳性病料,通过测序获得了7株PCV3全长基因序列,本研究选取其中1株作为代表株,设计一对针对去核定位信号的ORF2特异性引物,成功扩增PCV3全长基因序列并将其连……
