伍沙沙，王 延，徐 婷，刘晓龙，钱海兵

(贵州中医药大学，贵州省道地药材性效用一致性研究中心，贵州 贵阳 550025)

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种发病机制未知、对多个关节有影响的慢性、全身性自身免疫反应的疾病，主要病理表现为持续性的、慢性的滑膜炎性增生和形成的大量血管翳，导致关节损伤及不可逆性破坏，最终使得关节功能丧失[1]。在RA的发病过程中，涉及多种类型细胞之间的相互作用，其中成纤维样滑膜细胞起关键作用。该细胞可异常增殖、迁移、侵袭至血管及关节，也能在炎症环境下发生能量代谢异常，反过来促进其活化和滑膜炎症[2-3]。因此，抑制成纤维样滑膜细胞的活力，阻止其被活化，是治疗RA的关键，对RA药物的开发具有重要作用。

化合物Q-1来源于苗药铁筷子，是ACX库中未发现的全新化合物Q-1，课题组初步研究发现其具有抗炎、有效控制人RA成纤维滑膜细胞增殖的作用[4-5]。因此，本研究采用人RA成纤维样滑膜细胞株(MH7A)为研究对象，建立TNF-α引起的细胞炎症模型，基于NF-κB和MAPK信号通路来探索化合物Q-1的作用及机制，为化合物Q-1开发为RA的治疗药物提供理论支撑和实验依据。

1 材料

1.1 细胞人类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞株(MH7A)，购自吉妮欧生物公司。

1.2 药物、试剂与仪器化合物Q-1为实验室自制(纯度为98%以上)，甲氨蝶呤(MTX)(Sigma 公司，批号BCBN2516V)；胎牛血清(FBS)(BI公司，批号2033119)；DMEM 高糖培养基(Gibico公司，批号8120500)；二甲亚枫(DMSO)(Solarbio公司，批号1012D031)；人TNF-α重组蛋白(Peprotech公司，批号041525E1319)；CCK-8试剂盒(Bioss公司，批号AI04156754)；TNF-α和IL-6 ELISA试剂盒、兔抗人p38蛋白抗体(Abcam公司，批号分别为GR3323551-1，GR3336678-1，GR3215674-8)；……