甘霖 高乐 陈丽娜 何鹏

摘要：【目的】基于SRAP分子標记分析油梨种质资源的遗传多样性，为油梨种质资源新品种选育及创新利用提供理论依据。【方法】以50份油梨种质为材料，从184对SRAP引物组合中筛选出扩增条带清晰且多态性较好的引物组合，利用其对油梨种质材料进行PCR扩增，基于扩增结果，利用PopGene 1.32计算遗传多样性指数;利用NTSYS 2.1的UPGMA（非加权组平均法）计算遗传相似系数，并进行聚类分析。【结果】从184对SRAP引物组合中筛选出17对扩增条带清晰且多态性较好的引物，利用该17对引物对50份供试油梨种质材料进行PCR扩增，共扩增出322条条带，其中多态性条带有206个，平均每条引物扩增出12.12条，多态比率为63.75%。50份油梨种质材料的观测等位基因数（Na）为1.0844～1.4034，平均为1.2493;有效等位基因数（Ne）为1.0067～1.6028，平均为1.3390;Neis遗传多样性指数（H）为0.0642～0.1466，平均为0.1439;Shannons信息指数（I）为0.0634～0.1759，平均为0.1308。大岭2号与油梨种质4号的遗传一致度最高（0.9237），遗传相似系数最大（0.92），同时二者之间的遗传距离最小（0.1365），表明大岭2号与油梨种质4号种质间的亲缘关系最近。油梨种质5号与Fuerte间的遗传一致度相对最小（0.3765），且二者间的遗传距离最大（0.8253），说明油梨种质5号和Fuerte的亲缘关系相对最远。在遗传相似系数0.48处，50份油梨种质被分为四大类群，海南白沙油梨种质集中在第Ⅲ类群，海南儋州、广东湛江及广西南宁油梨种质在第Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ类群中均有分布，表明海南儋州、广东湛江及广西南宁油梨种质的遗传多样性均较丰富。【结论】海南儋州、广东湛江及广西南宁油梨种质的遗传多样性相对较丰富，可为油梨亲本选配和育种等方面的创新利用提供材料基础。

关键词： 油梨;SRAP;遗传多样性;群体结构

中图分类号： S667.902.4                               文献标志码： A 文章编号：2095-1191（2021）07-1798-08

Genetic diversity analysis of avocado germplasm resources based on SRAP molecular markers

GAN Lin1， GAO Le1， CHEN Li-na2， HE Peng1*

（1Rubber Research Institute， Chinese Academy of Tropical Agricultural Science， Danzhou， Hainan  571737， China;

2Guangzhou Experimental Station， Chinese Academy of Tropical Agricultural Science， Guangzhou  510140， China）

Abstract：【Objective】The genetic diversity of avocado germplasm resources was analyzed based on SRAP molecular markers，which provided a theoretical basis for the breeding and innovative utilization of new varieties of avocado germplasm resources. 【Method】Using 50 avocado germplasm as materials，184 pairs of SRAP primer combinations with clear amplification bands and good polymorphism were selected. The genetic diversity index of avocado germplasm was calculated by PopGene 1.32 based on the amplification results. The genetic similarity coefficient was calculated by UPGMA （unweighted group average method） of NTSYS 2.1，and cluster analysis was carried out. 【Result】A total of 17 primer pairs with clear amplification and good polymorphism were selected from 184 pairsof SRAP primer combinations. A total of 322 bands were amplified by PCR from 50 tested avocado germplasm materials by the 17 primer pairs，of which 206 were polymorphic，with an average of 12.12 amplified by each primer，and the polymorphism rate was 63.75%. The observed allele number（Na） of 50 avocado germplasm materials was 1.0844-1.4034，with an average of 1.2493，effective number of alleles（Ne） was 1.0067-1.6028，with an average of 1.3390. Neis genetic diversity index（H） was 0.0642-0.1466，with an average of 0.1439，Shannons information index（I） was 0.0634-0.1759，with an average of 0.1308. Daling 2 and avocado germplasm 4 had the highest genetic consistency（0.9237），the highest genetic similarity coefficient（0.92），and the lowest genetic distance（0.1365），indicating that Daling 2 and avocado germplasm 4 had the closest genetic relationship. The genetic consistency between avocado germplasm 5 and Fuerte was the minimum（0.3765），and the genetic distance between them was the largest（0.8253），indicating that the genetic relationship between avocado germplasm 5 and Fuerte was the farthest. At the genetic similarity coefficient of 0.48，50 avocado germplasm were divided into four groups. Avocado germplasm from Baisha，Hainan was concentrated in group III，and avocado germplasm from Danzhou， Hainan，Zhanjiang，Guangdong and Nanning，Guangxi were distributed in groups I，II and IV，indicating that avocado germplasm from  Danzhou，Hainan，Zhanjiang，Guangdong and Nanning，Guangxi were rich in genetic diversity. 【Conclusion】The genetic diversity of avocado germplasms from Danzhou，Hainan，Zhanjiang，Guangdong and Nanning，Guangxi are more abundant than that from Baisha，which provided a theoretical basis for innovation in parents selection and breeding.

Key words： avocado; SRAP; genetic diversity; population structure

Foundation item： Hainan Natural Science Foundation（319QN324）; Central Public-interest Scientific Institution Basal Research Fund for Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences（1630022018013）

0 引言

【研究意义】油梨（Persea americana Mill.）别名鳄梨、牛油果，属樟科油梨属常绿乔木果树，原产于拉丁美洲，其营养丰富，富含脂肪酸（8%～30%）、碳水化合物（2%～9%）、蛋白质（1%～3%）及多种维生素，香甜可口，既是水果又是粮食，具有“世界名贵果品”之称，在世界范围内的40多个国家和地区均有栽培，其种植面积高达50万ha，年产量为350万～400万t（应东山等，2018;Rosero et al.，2019;Tugiyanti et al.，2019）。我国于20世纪20年代初开始引种试种油梨，目前在海南、广东、广西和云南等地均有种植，其种植面积高达1.5万ha（李家兴，2010;何国祥，2012;张良等，2015）。近年来，我国对农业种质资源的收集、保存和利用工作十分重视，越来越多的科研单位和企业从国外引入油梨新品种，但对其品种间的亲缘关系、种群结构等信息尚不清楚，严重影响油梨种质的创新利用及其育种研究的深入发展。因此，研究分析油梨种质的遗传多样性对其种质资源保存、创新利用及新品种选育均具有重要意义。【前人研究进展】SRAP分子标记技术已广泛应用于作物种质的遗传多样性分析、种群结构分析、种质资源鉴定等研究领域，其中包括苹果（张春雨等，2009）、荔枝（赵玉辉等，2010）、梨（梁婷婷等，2015）、柚（林绍生等，2015）、芒果（罗世杏等，2018;刘荣等，2019）等果树。目前，我国对油梨遗传多样性的研究报道较少。李家兴（2010）根据生物学特性分析了贵州地区油梨种质的群体结构。周海兰（2016）利用12条多态性ISSR引物对112份油梨材料进行遗传多样性分析，在遗传相似系数为0.72时，供试材料分为七大类群。周海兰等（2016）建立了稳定的SSR-PCR反应体系及筛选出稳定的油梨SSR多态性引物。应东山等（2018）利用转录测序技术开发了34对多态性SSR引物，为油梨种群的遗传多样性分析及亲本鉴定提供新途径。周兆禧等（2019）以国内收集的170份油梨种质资源为材料，对其15个表型性状进行遗传多样性分析，结果表明油梨种质资源的遗传变异类型较丰富。郭俊等（2020）以32份油梨种质资源为材料，开发了40对多态性SSR引物，并将其分為四大类。【本研究切入点】目前鲜见利用SRAP分子标记进行油梨种质遗传多样性分析的研究报道。【拟解决的关键问题】开发多态性SRAP分子标记，分析不同油梨种质的遗传多样性和遗传结构，为油梨种质资源的创新利用和新品种选育提供理论依据。

1 材料与方法

1. 1 试验材料

供试的50份油梨种质分别来自中国热带农业科学院橡胶研究所五队试验基地（海南儋州）、南亚热带作物研究所国家热带果树种质资源圃（广东湛江）、广西职业技术学院果树基地（广西南宁）及海南省白沙市大岭农场（海南白沙）（表1）。主要试剂：Taq DNA聚合酶、dNTPs、PCR Buffer、DNA提取所需试剂、琼脂糖、丙烯酰胺、DL2000 DNA Marker等均购于上海生工生物工程技术服务有限公司，SRAP引物由深圳华大基因科技服务有限公司合成。主要仪器：低温高速离心机（Eppendorf centrifuge 5804R，德国）、梯度核酸扩增仪（TP1600，澳大利亚）、垂直电泳系统（北京六一仪器厂）和核酸凝胶成像系统（G-BOXF3）。

1. 2 样品采集和DNA提取

采集油梨嫩叶1～2片/株，采用CTAB法提取叶片DNA（周丽霞等，2013），于-20 ℃保存备用。

1. 3 引物筛选

随机选取大岭2号的DNA为模板，对184对SRAP引物组合进行筛选。反应总体系15.0 μL：DNA模板2.0 μL，2×Taq PCR Master-Mix（含染料）8.0 μL，正、反向引物各1.0 μL，ddH2O补足至15.0 μL。扩增程序：94 ℃预变性5 min;94 ℃ 30 s，35 ℃ 1 min，72 ℃ 30 s，进行5个循环，将退火温度升至56.4 ℃，进行30个循环;72 ℃延伸7 min。

1. 4 统计分析

用Excel 2010统计PCR产物中清晰可辨的条带数，相同位置有条带的记为“1”，无条带的记为“0”，从而构建成原始数据矩阵。利用NTSYS 2.1的UPGMA（非加权组平均法）计算遗传相似系数，并绘制聚类图;利用PopGene 1.32计算遗传多样性指数。

2 结果与分析

2. 1 SRAP引物筛选结果

以大岭2号DNA为模板，利用184对SRAP引物组合进行PCR扩增，根据PCR产物条带的清晰度、稳定性及多态性的丰富度，共筛选出17对SRAP引物，引物序列如表2所示。利用该17对引物对50份供试油梨种质材料进行PCR扩增，共扩增出322条条带，其中多态性条带有206条，平均每条引物扩增出12.12条，多态比率为63.75%（表2）。图1为引物组合Me7/Em18对50份供试油梨种质的扩增图谱，同一引物针对不同的供试油梨种质材料，其扩增结果差异较大，说明该供试群体的遗传多样性较丰富。可见，SRAP分子标记可用于油梨种质的遗传多样性分析。

2. 2 油梨种质资源的遗传多样性分析结果

应用PopGene 1.32计算50份油梨种质的遗传多样性指数，结果如表3所示。50份油梨种质的观测等位基因数（Na）为1.0844～1.4034，平均为1.2493;有效等位基因数（Ne）为1.0067～1.6028，平均为1.3390;Neis遗传多样性指数（H）为0.0642～0.1466，平均为0.1439;Shannons信息指数（I）为0.0634～0.1759，平均为0.1308，说明50份油梨种质材料的遗传多样性较丰富。

50份油梨种质材料的遗传一致度和遗传距离如表4所示。广东湛江与海南儋州的遗传一致度相对最高，为0.9237，同时二者之间的遗传距离最小，为0.1365，说明这两个地区油梨种质的亲缘关系最近。广西南宁与广东湛江油梨种质的遗传一致度相对最小，为0.4308，且二者的遗传距离最大，为0.6730，说明这两个地区间油梨种质的亲缘关系相对最远。

应用NYSTS 2.1计算油梨遗传相似系数，结果（表5）显示50份供试油梨材料的遗传相似系数为0.22～0.92，其中大岭2号（编号1）与油梨种质4号（编号2）的遗传相似系数最大，为0.92，说明二者亲缘关系最近;油梨种质4号（编号2）与Fuerte（编号5）的遗传相似系数最小，为0.22，说明二者亲缘关系最远。

2. 3 油梨种质资源的聚类分析结果

为了分析50份供试油梨种质的群体结构，应用UPGMA对其进行聚类分析，结果见图3。在遗传相似系数为0.48时，50份供试油梨种质被分为四个大类群，其中来自海南白沙市的油梨种质集中分布在第Ⅲ类群，其他3个地区的油梨种质在第Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ类群中均有分布。第Ⅰ类群含有20份油梨种质：大岭2号、油梨种质5号、Hass、RN-1、RN-4、RN-5、Beta、Tonnie、Simmonds、Migule、Monroe、Wilson seedless、NR-3、RLW-3、RLW-4、RLW-10、GY-5、GY-7、GY-15和GY-16;第Ⅱ类群含有15份油梨种质：Fuerte、RN-11、RN-17、RN-18、Dupuis、Tonnage、Brooks late、Loretta、Peterson、NR-5、RLW-2、RLW-6、GY-2、GY-3和GY-11;第Ⅳ类群含有5份油梨种质：油梨种质4号、Lula、NR-10、RLW-1和GY-12。表明海南省白沙市油梨种质的遗传多样性相对单一，遗传背景相对狭窄，群体内亲缘关系较接近;海南儋州、广东湛江和广西南宁的油梨种质在第Ⅰ、Ⅱ和Ⅳ类群中均有分布，说明其遗传多样性丰富度高，亲缘关系较远，群体结构较复杂。总体来看，50份供试油梨种质的遗传多样性较丰富。

3 讨论

3. 1 SRAP分子标记是分析油梨遗传多样性的有效手段

SRAP分子标记已广泛用于多种植物种质资源的遗传多样性分析（王国泽等，2013），但鲜见应用于油梨的相关研究报道。本研究应用SRAP分子标记对50份油梨种质材料进行遗傳多样性分析，共筛选出17对多态性较好的引物组合，获得322个清晰的位点，其中多态性位点有206个，其多态比率为63.75%。该结果高于孟慧等（2018）对海南降香檀（52.8%）、高宁宁等（2019）对甜瓜（58.0%）的SRAP多态比率，低于洪建聪等（2019）对野生白及（90.6%）的SRAP多态比率，说明SRAP分子标记是一种可用于油梨遗传多样性分析的有效手段。

3. 2 基于SRAP分子标记的油梨种质资源遗传特点

观测等位基因数（Na）、有效等位基因数（Ne）、Neis多样性指数（H）和Shannons信息指数（I）是判断物种间种质资源遗传多样性丰富度的常用指标，可明确当前收集的油梨遗传变异动向，了解其遗传多样性，为育种工作提供理论基础。本研究中，供试50份油梨种质的Na为1.7225，Ne为1.8818，H为0.1977及I为0.1308，与红米（马孟莉等，2019）、铁皮石斛（杨贞等，2019）的研究结果相似，表明供试油梨种质的遗传多样性较丰富。其中，来自广东湛江的油梨种质遗传多样性指数（Na、Ne、H和I）最高，其次为广西南宁，海南白沙的油梨种质遗传多样性指数最低，结果表明广东湛江和广西南宁的油梨种质遗传多样性较丰富，海南儋州油梨种质的遗传背景相对丰富，海南白沙油梨种质的遗传背景最简单，亲缘关系最近。

本研究应用UPGMA对50份油梨种质材料进行聚类分析，结果将其分为四大类群，其中海南白沙的油梨种质主要集中分布在第Ⅲ类群，而其他3个地区的种质分布较为分散，说明海南儋州、广东湛江及广西南宁油梨种质遗传多样性较高，海南白沙油梨种质的遗传多样性相对最低，与上述计算所得的遗传多样性指数结果相符。不同种源遗传多样性参数差异明显，遗传多样性的变化原因较复杂，其本质原因是物种等位基因数目或频率的变化，同时受遗传漂变、自然选择等因素影响，还包括人为干扰、环境变化及地理隔离等。我国从20世纪20年代开始引种油梨，目前广泛种植在广东、广西、福建及海南等省（区），其中广东和广西已建成我国重要的油梨生产基地，涵盖了从墨西哥和印度尼西亚等国家引入的多个优良油梨种质，1960年儋州华安热带作物学院在其试验站内开始建油梨种植园，先后分别从美国和澳大利亚引入多种适合海南西部地区种植的油梨品种。因此，广东、广西和海南儋州涵盖的的油梨种质遗传背景相对丰富，基因流影响较大，遗传相似性较低，遗传多样性水平也较高。海南白沙大岭农场现主要是以家庭分散的经营模式为主，农场油梨园为辅，粗放式管理，品种未更新，遗传相似性较高，遗传多样性相对较低。可见，SRAP分子标记可有效地判断油梨种质亲缘关系的远近，同时可用于鉴定评价物种种质资源群体结构的有效方法。

优良且多样的种质资源可为新品种培育提供基础材料，只有掌握种质资源的种群结构、遗传背景及遗传信息，才能对其进行充分有效的创新利用。本研究应用SRAP分子标记对50份油梨种质材料进行遗传多样性分析，结果发现海南儋州、广东湛江及广西南宁油梨种质的遗传多样性较丰富，遗传背景较复杂。在此基础上，今后应进一步调查研究海南儋州、广东湛江及广西南宁地区油梨的表型性状，并与遗传性状进行关联分析，为亲本选配及油梨新品种培育提供材料基础。

4 结论

海南儋州、广东湛江及广西南宁油梨种质的遗传多样性较丰富，可用作油梨亲本选配育种及创新利用的基础材料。

参考文献：

高宁宁，常高正，康利允，李晓慧，梁慎，李海伦，赵卫星. 2019. 基于SRAP标记的甜瓜耐盐种质资源遗传多样性分析[J]. 西北植物学报，39（1）：68-75. doi：10.7606/j.issn. 1000-4025.2019.01.0068. [Gao N N，Chang G Z，Kang L Y，Li X H，Liang S，Li H L，Zhao W X. 2019. Genetic diversity analysis of salt tolerance germplasm resources of melon based on SRAP[J]. Acta Botanica Boreali-Occidentalia Sinica，39（1）：68-75.]

郭俊，朱婕，谢尚潜，张叶，叶蓓蕾，郑丽燕，凌鹏. 2020. 油梨转录组SSR分子标记开发与种质资源亲缘关系分析[J]. 园艺学报，3（8）：1552-1564. doi：10.16420/j.issn.0513-353x.2019-0840. [Guo J，Zhu J，Xie S Q，Zhang Y，Ye B L，Zheng L Y，Ling P. 2020. Development of SSR mole-cular markers for transcriptome of avocado and analysis of genetic relationship of germplasm resources[J]. Acta Horticulturae Sinica，3（8）：1552-1564.]

何国祥. 2012. 广西油梨科研生产的现状及发展前景[J]. 广西职业技术学院学报，5（1）：1-6. [He G X. 2012. The situation and developing prospect of avocado research and production in Guangxi[J]. Journal of Guangxi Vocational and Technical College，5（1）：1-6.]

洪建聪，郭艳，翟利娜，陈铌铍，丁志山，金波. 2019. 野生白及资源遗传多样性的SRAP分析[J]. 中草药，50（8）：301-308. doi：10.7501/j.issn.0253-2670.2019.08.029. [Hong J C，Guo Y，Zhai L N，Chen N P，Ding Z S，Jin B. 2019. Genetic diversity of wild Bletilla striata based on SRAP markers[J]. Chinese Traditional and Herbal Drugs，50（8）：301-308.]

李家兴. 2010. 油梨在贵州亚热带地区的适应性及发展前景[J]. 贵州农业科学，38（2）：165-167. doi：10.3969/j.issn. 1001-3601.2010.02.052. [Li J X. 2010. Adaptability of avocado and its development prospect in subtropical area of Guizhou Province[J]. Guizhou Agricultural Sciences，38（2）：165-167.]

梁婷婷，马燕，臧德奎. 2015. 梨属野生资源遗传多样性的SRAP分析[J]. 北方园艺，39（13）：1-5. doi：10.11937/bfyy.201513001. [Liang T T，Ma Y，Zang D K. 2015. Genetic diversity analysis of wild germplasm resource of Pyrus based on SRAP markers[J]. Northern Horticulture，39（13）：1-5.]

林绍生，刘冬峰，郭秀珠，黄品湖，徐文荣，陈巍. 2015. 浙江柚类地方资源SRAP标记的遗传多样性分析[J]. 分子植物育种，5（3）：562-566. doi：10.13271/j.mpb.013.000562. [Lin S S，Liu D F，Guo X Z，Huang P H，Xu W R，Chen W. 2015. Analyses of genetic diversity of pummelo（Ci-trus grandis Osbeck） in Zhejiang gerplasms by SRAP markers[J]. Molecular Plant Breeding，5（3）：562-566.]

劉荣，龚德勇，刘清国，黄海，范建新. 2019. 基于SRAP分子标记的13份贵州芒果种质资源遗传多样性分析[J]. 热带作物学报，40（1）：87-91. doi：10.3969/j.issn.1000-2561. 2019.01.013. [Liu R，Gong D Y，Liu Q G，Huang H，Fan J X. 2019. Genetic diversity analysis of thirteen mango germplasm resources based on SRAP molecular markers[J]. Chinese Journal of Tropical Crops，40（1）：87-91.]

罗世杏，唐玉娟，黄国弟，宋恩亮. 2018. 利用SRAP分子标记分析杧果种质遗传多样性[J]. 热带作物学报，39（12）：2369-2376. doi：10.3969/j.issn.1000-2561.2018.12.007. [Luo S X，Tang Y J，Huang G D，Song E L. 2018. Genetic diversity analysis of mango by SRAP markers[J]. Chinese Journal of Tropical Crops，39（12）：2369-2376.]

马孟莉，周晓梅，郑云，张婷婷，张晓倩，卢丙越. 2019. 基于SRAP标记的哈尼梯田红米遗传多样性及群体结构分析[J]. 分子植物育种，17（7）：2231-2237. doi：10.13271/j.mpb.017.002231. [Ma M L，Zhou X M，Zheng Y，Zhang T T，Zhang X Q，Lu B Y. 2019. Genetic diversity analysis of Hani terrace red rice by SRAP markers[J]. Mole-cular Plant Breeding，17（7）：2231-2237.]

孟慧，杨云，陈波. 2018. SRAP技术分析海南降香檀遗传多样性[J]. 热带农业科学，12（1）：37-42. doi：10.12008/j.issn. 1009-2196.2018.12.008. [Meng H，Yang Y，Chen B. 2018. Analysis of genetic diversity of Dalbergia odorifera gro-wing in Hainan by SRAP[J]. Chinese Journal of Tropical Agriculture，12（1）：37-42.]

王国泽，左福元，曾兵. 2013. SRAP分子标记的研究进展及在植物上的应用[J]. 畜牧与兽医，45（9）：92-95. [Wang G Z，Zuo F Y，Zeng B. 2013. Research progress of SRAP molecular markers and its application in plants[J]. Animal Husbandry & Veterinary Medicine，45（9）：92-95.]

杨贞，蔡友铭，张永春. 2019. 基于SRAP分子标记的铁皮石斛遗传多样性分析[J]. 上海农业学报，5（6）：23-27. doi：10.15955/j.issn1000-3924.2019.05.05. [Yang Z，Cai Y M，Zhang Y C. 2019. Genetic diversity analysis of Dendrobium candidum based on SRAP markers[J]. Acta Agriculturae Shanghai，5（6）：23-27.]

應东山，唐浩，韩瑞玺，王文林，王明，王琴飞，汤秀华，张如莲. 2018. 基于转录组测序的油梨EST-SSR引物开发[J]. 热带作物学报，39（12）：2446-2451. doi：10.3969/j.issn. 1000-2561.2018.12.017. [Ying D S，Tang H，Han R X，Wang W L，Wang M，Wang Q F，Tang X H，Zhang R L. 2018. Development EST-SSR markers based on transcriptome sequencesin avocado[J]. Chinese Journal of Tropical Crops，39（12）：2446-2451.]

张春雨，陈学森，林群，苑兆和，张红，张小燕，刘崇祺，吴传金. 2009. 新疆野苹果群体遗传结构和遗传多样性的SRAP分析[J]. 园艺学报，36（1）：7-14. doi：10.3321/j.issn：0513-353X.2009.01.002. [Zhang C Y，Chen X S，Lin Q，Yuan Z H，Zhang H，Zhang X Y，Liu C Q，Wu C J. 2009. SRAP markers for population genetic structure and genetic diversity in Malus sieversii from Xinjiang，China[J]. Acta Horticulturae Sinica，36（1）：7-14.]

张良，张德生，刘康德. 2015. 海南省油梨产业发展的环境分析与对策[J]. 中国农业资源与区划，36（4）：78-84. doi：10.7621/cjarrp.1005-9121.20150412. [Zhang L，Zhang D S，Liu K D. 2015. Environment analysis and policy for development of avocado industry in Hainan[J]. Chinese Journal of Agricultural Resources and Regional Planning，36（4）：78-84.]

赵玉辉，郭印山，胡又厘，张斌，刘睿，欧阳若，傅佳欣，刘成明. 2010. 应用RAPD、SRAP及AFLP标记构建荔枝高密度复合遗传图谱[J]. 园艺学报，3（5）：697-704. doi：10.16420/j.issn.0513-353x.2010.05.009. [Zhao Y H，Guo Y S，Hu Y L，Zhang B，Liu R，Ouyang R，Fu J X，Liu C M. 2010. Construction of a genetic Linkage map of litchi with RAPD，SRAP and AFLP[J]. Acta Horticulturae Sinica，3（5）：697-704.]

周海兰，李绍鹏，李卫亮，贺军虎，包冬红，李茂富. 2016. 油梨基因组DNA提取、SSR-PCR反应体系优化及引物筛选[J]. 生物技术通报，32（4）：143-150. doi：10.13938/j.issn. 1007-1431.20200354. [Zhou H L，Li S P，Li W L，He J H，Bao D H，Li M F. 2016. DNA extraction，optimization of SSR-PCR reaction system and primer screening of persea Americana[J]. Biotechnology Bulletin，32（4）：143-150.]

周海兰. 2016. 油梨种质资源遗传多样性分析[D]. 海口：海南大学. doi：10.3969/j.issn.1008-0384.2011.05.013. [Zhou H L. 2016. Genetic diversity analysis of avocado germplasm resources[D]. Haikou：Hainan University.]

周丽霞，肖勇，杨耀东，马子龙. 2013. 油棕基因组DNA 3种提取方法的比较研究[J]. 江西农业学报，25（8）：9-11. doi：10.3969/j.issn.1001-8581.2013.08.003. [Zhou L X，Xiao Y，Yang Y D，Ma Z L. 2013. Comparison of three extract methods for genomic DNA of Elaeis guineensis[J]. Acta Agriculturae Jiangxi，25（8）：9-11.]

周兆禧，陈莹，明建鸿，高宏茂，马蔚红，林兴娥. 2019. 基于表型性状的油梨種质资源遗传多样性分析[J]. 园艺与种苗，39（3）：18-23. doi：10.16530/j.cnki.cn21-1574/s.2019. 03.006. [Zhou Z X，Chen Y，Ming J H，Gao H M，Ma W H，Lin X E. 2019. Evaluation and genetic diversity of Persea americana Mill. based on phenotypic traits[J]. Horticulture & Seed，39（3）：18-23.]

Rosero J C，Cruz S，Osorio C，Hurtado N. 2019. Analysis of phenolic composition of byproducts（seeds and peels） of avocado（Persea americana Mill.） cultivated in Colombia[J]. Molecules，24（17）：3209. doi：10.3390/molecules241 73209.

Tugiyanti E，Iriyanti N，Apriyanto Y S. 2019. The effect of avocado seed powder（Persea americana Mill.） on the liver and kidney functions and meat quality of culled female quail（Coturnix coturnix japonica）[J]. Veterinary World，12（10）：1608-1615. doi：10.14202/vetworld.2019.1608-1615.

（责任编辑 陈 燕）