牛结节性皮肤病病毒GPCR基因荧光定量PCR检测方法的建立

2021-11-02原耀贤孙铭澮黄伟楠李康健马春全佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528225广东省揭阳市惠来县溪西畜牧兽医站广东揭阳5525广州市微生物研究所有限公司广东广州50700

中国兽医学报 2021年9期

原耀贤，孙铭澮，黄伟楠，李康健，何威，付强，马春全，刘全，马骏* (.佛山科学技术学院生命科学与工程学院，广东佛山 528225；2.广东省揭阳市惠来县溪西畜牧兽医站，广东揭阳 5525；.广州市微生物研究所有限公司，广东广州 50700)

牛结节性皮肤病(lumpy skin disease，LSD)是由痘病毒科(Poxviridae)脊髓动物痘病毒亚科(Chordopoxvirinae)羊痘病毒属(Capripoxvirus)的双链DNA病毒——牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus，LSDV)引起的牛病毒性疾病[1]。患病动物的皮肤表面会形成坚硬的结节或溃疡；发病过程中体温上升、精神萎靡、体质量减轻、伴有流泪、流涕和流涎。患病奶牛产奶量减少，母牛可能会流产并伴有几个月的不发情期，公牛会暂时不育或永久不育[2]，该病严重时会导致动物死亡。因此，LSD被世界动物卫生组织(OIE)列为必须通报的疫病[3]，被我国进境疫病名录列为一类动物疫病。

LSD于1929年在非洲赞比亚首次被发现。2013—2017年LSD由非洲传入中东，逐渐形成了全球蔓延的趋势[4]。2019年8月，该病传入我国，在我国新疆伊犁地区首次暴发[5]。目前，LSD已在我国几个省份有报道发病并执行扑杀政策[6]。因此，鉴于LSD的流行趋势，建立一种准确、快速的LSDV检测方法具有重要意义。

实时荧光定量PCR方法(real-time quantitative PCR，qPCR)具有操作简便、特异性强、敏感性高等特点，广泛应用于病原微生物的临床检测中。目前，我国针对LSDV的qPCR检测方法的相关报道较少。因此，本研究基于LSDV的G-protein-coupled chemokine receptor(GPCR)基因，设计了针对LSDV的qPCR检测方法，为早期感染动物的发现和疑似病例的诊断提供依据。