彭云武,王荣辉,楚 渠, 梁嘉俊, 孟 刚, 凌 君

(1.安康学院 陕西省蚕桑重点实验室,陕西 安康 725000;2.陕西省安康市蚕种场, 陕西 安康 725000)

硒是1957年德国科学家Schwarz证明为人和动物必需的微量元素之一[1]。安康市各种中药材含硒[2,3]。查询资料显示安康是国内最大的天然富硒区[4,5]。1-脱氧野尻霉素(1-DNJ)是一种极性化合物 ，在医疗保健方面有着重大的应用价值[6,7,8]。类黄酮是一类多苯化合物，属于植物次生代谢物。桑树被国家卫生部确认为“药食同源”植物。陕西石泉珍爱生态农业科技开发有限公司年生产桑叶粉、桑叶茶等产品达30 t，陕西福臻茶业有限公司年产桑叶茶50 t。目前已经有相关文献报道了桑树类黄酮、1-脱氧野尻霉素等含量的测定分析[9,10,11]，鉴于此，于2019年5月15日同时采取9个桑树品种的顶桑芽叶和7～8位成熟片叶烘干分析其硒、类黄酮、1—DNJ的含量，为桑叶的综合利用提供理论数据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

试验桑树品种有：908诱、陕桑305、荷叶白、强桑一号、农桑14、双安-农桑8号、育71-1、金十、丰田2号。2019年5月15日结合春季大蚕期桑树摘心技术处理分别采摘桑芽和芽端向下第7～8位的成熟新鲜叶片，洗掉灰尘等杂物，自然通风条件下晾干后放入预热电热鼓风干燥箱内85℃，烘干备用。

茶叶：紫阳县焕古镇茶叶，市场上购买。

土壤：在采摘紫阳县双安镇林本河村双安-农桑8号桑叶样本时取桑树位置地表下15 cm处的土壤，在安康学院恒口蚕桑基地取桑园地表下15 cm处的土壤。

1.2 仪器药品

电感耦合等离子体质谱仪 、原子荧光光度计、电子天平、电热恒温鼓风干燥箱、超声波清洗机、可见分光光度计/酶标仪、自动控温消化炉、高效液相色谱仪等。

浓硝酸(GR)、1%硝酸、60%乙醇、蒸馏水、盐酸、乙腈 、醋酸 、甲醇、植物类硒测定试剂盒、1-DNJ试剂盒、植物类黄酮试剂盒。

1.3 试验方法

1.3.1 硒的测定 植物硒元素含量的测定：采用硝酸消解，ICP-MS法测定植物硒元素含量[12]。称取干试样 0.5 g，消化，消化液定容至刻度备用，试液上机测定硒元素含量。

土壤硒元素含量的测定：采用硝酸-双氧水-氢氟酸消解，ICP-MS法测定土壤硒元素含量[13]。称取待测样品0.2 g，消化，消化液定容摇匀，试液上机测定硒元素含量。

1.3.2 类黄酮的测定 样本烘干粉碎，称取0.02 g，加入提取液，提取2h，离心10 min，取上清液上样到分光光度计/酶标仪，测定510 nm处吸光值。根据测定的数值计算桑叶中的类黄酮含量。

1.3.3 1-DNJ的测定 9个桑树品种样本的桑叶1-DNJ含量的测定所采样品均采用反相高效液相色潽-紫外检测法测定[14]。称取0.1 g样本，加入试剂三，过夜浸提，取离心上清液。取样本上清液，加入试剂一和试剂二，反应30 min，加入试剂三定容至1 mL，加样品在高效液相色潽仪进行测试。

1.4 数据统计分析

试验测定的数据用DPS 15.10软件分析。

2 结果与分析

2.1 9个不同桑树品种和2份土壤硒的含量

从图1可知，桑树品种的硒含量桑芽比片叶低，只有双安-农桑8号和908诱桑芽比片叶高；从桑芽与片叶的平均数看，桑树品种之间硒含量依次为农桑14硒含量0.38 mg·kg-1、陕桑305硒含量0.33 mg·kg-1、育71-1硒含量0.27 mg·kg-1、强桑一号和荷叶白硒含量0.24 mg·kg-1、金十和丰田2号硒含量0.23 mg·kg-1、双安-农桑8号硒含量0.71 mg·kg-1、908诱硒含量0.08 mg·kg-1、焕古炒青茶硒含量0.24 mg·kg-1、安康学院恒口蚕桑基地土壤硒含量0.17 mg·kg-1、紫阳县双安镇林本河村土壤硒含量0.25 mg·kg-1，结果显示桑树的硒含量品种之间存在差异，桑树富硒能力较强。

图1 试验样品的硒含量/(mg·kg-1)

2.2 不同桑树品种的类黄酮含量

从图2可知，桑树品种的桑芽与片叶含类黄酮的量因品种不同有差异；从桑芽与片叶的平均数看，桑树品种之间类黄酮含量依次为陕桑305号40.64 mg·g-1、强桑一号37.82 mg·g-1、丰田2号37.63 mg·g-1、荷叶白32.26 mg·g-1、金十28.73 mg·g-1、育71-1 28.05 mg·g-1、双安-农桑8号26.19 mg·g-1、农桑14含量24.21 mg·g-1、908诱22.94 mg·g-1、焕古炒青茶含量86.77 mg·g-1。结果显示桑树的类黄酮含量品种之间存在差异，桑叶的类黄酮含量低于茶叶。

图2 样品中类黄酮含量/(mg·g-1干重)

2.3 不同桑树品种的1-DNJ含量

从图5可知，桑树品种的桑芽比片叶1-DNJ含量高，只有强桑一号和908诱桑芽比片叶低；从桑芽与片叶的平均数看，桑树品种之间的1-DNJ含量依次为908诱1.75 mg·g-1、农桑14 号1.25 mg·g-1、丰田2号1.07 mg·g-1、育71-1含量1.06 mg·g-1、强桑一号0.98 mg·g-1、金十0.95 mg·g-1、双安-农桑8号0.85 mg·g-1、荷叶白0.76 mg·g-1、陕桑305含量0.59 mg·g-1、焕古炒青茶1-DNJ含量0.52 mg·g-1。结果显示桑树的1-DNJ含量品种之间存在差异，桑叶的1-DNJ含量高于茶叶。

图3 1-DNJ空白标准图谱

图4 1-DNJ桑叶样本图谱

图5 1-DNJ含量/(mg·g-1)

3 结论

(1)桑树的桑芽硒含量比片叶含量低；桑树品种的硒含量依次是农桑14号0.38 mg·kg-1﹥陕桑305硒含量0.33 mg·kg-1﹥育71-1硒含量0.27 mg·kg-1﹥强桑一号和荷叶白硒含量0.24 mg·kg-1﹥金十和丰田2号硒含量0.23 mg·kg-1﹥双安-农桑8号硒含量0.71 mg·kg-1﹥908诱硒含量0.08 mg·kg-1。焕古炒青茶硒含量0.24 mg·kg-1，安康学院恒口蚕桑基地土壤硒含量0.17 mg·kg-1、紫阳县双安镇林本河村土壤硒含量0.25 mg·kg-1。桑树的硒含量品种之间存在差异，桑树富硒能力较强。

(2)桑树的桑芽类黄酮含量与片叶类黄酮含量因桑树品种不同有差异；桑树品种之间类黄酮含量依次为陕桑305号40.64 mg·g-1﹥强桑一号 37.82 mg·g-1﹥丰田2号37.63mg·g-1﹥荷叶白32.26 mg·g-1﹥金十28.73 mg·g-1﹥育71-1含量28.05 mg·g-1﹥双安-农桑8号26.19 mg·g-1﹥农桑14号24.21 mg·g-1﹥908诱22.94 mg·g-1，焕古炒青茶86.77 mg·g-1。桑树的类黄酮含量品种之间存在差异，桑叶的类黄酮含量低于茶叶。

(3)桑树的桑芽1-DNJ含量比片叶高；桑树品种的1-DNJ含量依次为908诱1.75 mg·g-1﹥农桑14号1.25 mg·g-1﹥丰田2号1.07 mg·g-1﹥育71-1含量1.06 mg·g-1﹥强桑一号0.98 mg·g-1﹥金十0.95 mg·g-1﹥双安-农桑8号0.85 mg·g-1﹥荷叶白0.76 mg·g-1﹥陕桑305号0.59 mg·g-1，焕古炒青茶1-DNJ含量0.52 mg·g-1。桑树的1-DNJ含量品种之间存在差异,该试验结果验证了安康地区桑树品种中桑叶DNJ含量具有显著差异的结论[11]，桑叶的1-DNJ含量高于茶叶。