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接触性检材DNA检验影响因素分析

2021-10-30石莉娜娄中文刘军铭

科学与生活 2021年19期
关键词:物证检出率载体

石莉娜 娄中文 刘军铭

摘要:随着犯罪嫌疑人的反侦查意识及能力增强,接触性检材在现场提取检材中所占比重增大,现场接触性检材DNA在案件侦破过程中发挥的作用也日渐明显。本文阐述接触性检材的处理方法和DNA检验的常见方法,探讨影响接触性检材检验结果的因素,意在表述接触性检材DNA检验的价值。

近年,随着媒体对公安工作的宣传,刑事案件的侦查手段已经不是秘密,犯罪分子的反侦查手段的日益狡猾,明显的生物物证常常被有意识的销毁和破坏,而来自人体代谢脱落细胞由于微小痕量,常被忽略。对于这些潜在的微量生物物证,一旦成功地获得了关键物证的DNA分型,往往就能够成为案件侦破的关键线索,并为案件定性及法庭量刑提供科学证据。

如何发现和采集现场微量检材,准确及时提取到关键物证,选择合理的检验方法,得到有效的STR分型,对节省警力,有效节约破案成本,为侦查部门提供强有力的线索有重要意义。

一、接触类检材的处理方法

(一)脱落细胞粘取器

1.对于金属、塑料、橡胶效果较好。

2.不适合玻璃、木质、大理石、砖头等,建议采用棉签等擦拭。

3.不适合尘土较多、油污、潮湿的接触性检材。

优点:采集效率高、释放效率高,对极微量的接触类检材提取效果好;

缺点:适用范围相对有局限

(二)棉签标准两步法擦拭

1.适用于大多数接触性检材,特备是凹凸不平、灰尘较多、载体表面潮湿以及位置面积较大的接触性检材。

2.对于塑料、漆面等基底的样本采集效率低于粘取器,在对现场载体转移时要用半干棉签反复擦拭。

3.直接剪取。

(1)样本较集中的衣领、口罩等针织检材,剪取的载体应尽量小。

(2)渗透性的纸张。如纸张能看到明显指(掌) 纹印,或用茚三酮熏显。

(三)脱落细胞提取仪

适用于样本分布面积较大的软质载体或表层疏松检材,如衣物、棉帽、床单等,脱落细胞提取仪可以有效的对细胞进行富集,提高检材检出率。

二、接触性生物物证DNA检验常见方法

1.磁珠纯化法:通过细胞裂解液的使用,对细胞实施裂解,使其内部DNA得以释放,再添加适量磁性颗粒,将细胞内游离态DNA分子予以吸附,而细胞内蛋白质、血红蛋白等杂质无法被磁性颗粒所吸附,从而余留于细胞裂解液内。随后,磁场条件下,可实现液体、磁性颗粒间有效分离,通过对磁性颗粒的回收,加之纯水、TE液的作用完成DNA洗脱和收集工作。利用磁珠纯化法,具有操作简易、回收率高、模板纯净、自动化收集的优势,当前行业领域商品化磁珠DNA试剂提取盒和减少繁琐手工操作的纯化仪已存在,但因耗时长和成本高、耗材贵等缺陷,使之磁珠纯化法应用范围受到局限。

2.过滤柱法:利用硅胶旋转柱对磁性颗粒实施替换,即选择超滤膜对其DNA分子予以截取,对其他杂质实施过滤。目前该类型商品化试剂提取盒也存在,其操作简便、回收率高,但其大分子污染物残留、DNA检出率低、过滤柱成本较高,促使法医在针对接触性生物物证DNA检验中,应充分结合检材条件与资金成本,对DNA检测法进行合理选择。

三、接触性检材法医DNA检验影响因素

1.提取时间:因表皮细胞离体后机体功能、溶酶体均会受到影响,如机体功能活性降低、溶酶体大量释出,溶酶体通过对高分子物质、复合物实施逐层降解,该过程属于表皮细胞自溶现象。而在表皮细胞出现自溶后,核染色体呈现固缩或碎裂,使DNA得以溶解。DNA自溶、降解具有一定的规律,一般在72 小时内自溶和降解速率影响因素较小,而超过该期限则会加快溶解速率。

2.提取环境:

(1)外界环境。接触性检材DNA检验需在无菌环境下进行,若选择自然环境作为DNA提取空间,则会受到光源和潮湿、高温与灰尘、昆虫以及细菌等因素的影响。

(2)载体环境。表面粗糙、密度低载体空间,如石块、木块、针织品等载体,其表皮细胞脱落DNA检出率较高;而表层光滑、密度高载体空间,如橡胶或金属等,DNA检出率明显有所降低。此外,载体污染程度也是影响DNA降解速率的主要因素。

(3)人源性污染。对于接触性检材而言,其DNA含量普遍偏低,若被常量DNA载体所覆盖,如血迹或唾液等,结合STR检验可有效实现DNA模量扩增的目的,但会对接触性DNA检出率产生影响;若接触性检材多样,则会有交叉污染问题,从而使DNA检出分型呈混合型模式。不利于后期的认定工作。

接触类检材由于接触面积广、DNA 含量少、易被污染,发现及提取难度大,为提取到有效的脱落细胞,检验接触类检材DNA就要注意以下问题:

(一)了解案情,准确分析提取接触类检材的重点部位。检验前了解案情,了解物证所处案件现场的环境及各个物证之间的关系,分析接触类检材接触部位,采取相应的提取方法。

(二)控污染,由于接触性检材的DNA 含量很少,极易被污染,任何污染都有可能造成检验的失败,现勘人员应第一时间保护现场,在采集检材时做好自身防护。采集时使用无污染的采集产品,反复使用的器械在使用后要严格的清洗消毒,一次提取一件检材,并注意保护采集的样本,避免样本间的交叉污染。

对现场物证接触性DNA及时提取并在短时间内完成送检工作;最大限度上提高脫落细胞接触性DNA模量;选择个人防护或单独包装的形式,避免接触性DNA发生污染;通过对接触性DNA载体清洁度的控制,对其提取方法进行合理选择。

【参考文献】

[1]张广峰,陈松,凃政等。接触DNA检验成功率的影响因素探讨[J]刑事技术,2013,(3):9-13.

[2]陈松,胡兰.低拷贝模板STR分型及其存在的问题[J].中国法医学杂志,2003,18(5):314-316.

[3]邵武,姜先华,李秋阳,等.衣物载体上人体脱落细胞的负压吸附采集法[J]中国法医学杂志,2009,24(4):272-274.

[4]刘海渤,冯保强,黄颖,等.3种提取接触性检材脱落表皮细胞DNA方法的实验研究[J]昆明医学大学学报,2012,(12):36-40.

作者简介:

石莉娜,女,1983年8月出生,硕士研究生,中级。

娄中文,男,1990年8月,大学本科,中级。

刘军铭,男,1988年5月,硕士研究生,中级。

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