检测羊肠道病毒RT-PCR方法的建立及初步应用
2021-10-30胡俊英李卓宸蔡梦露王玮玉王浴光王新平吉林大学动物医学学院教育部人兽共患病研究重点实验室吉林长春130062
董 坤,胡俊英,李卓宸,蔡梦露,章 凡,王玮玉,王浴光,王新平 (吉林大学 动物医学学院 教育部人兽共患病研究重点实验室,吉林 长春 130062)
羊肠道病毒(caprine enterovirus,CEV)感染是近年来国内外报道的新发传染病[1],临床上多以消化道和呼吸道症状为特征,发病羊群呈现腹泻、呼吸困难,某些羊群呈现较高的发病率和死亡率。作为新发传染病,CEV感染广泛存在于国内不同地区的羊群,给养羊业造成了较为严重的经济损失[2]。引起CEV感染的病原体为肠道病毒,属于小RNA病毒科(Picornaviridae)肠道病毒属成员,是引起人类与动物临床上以消化道、呼吸道、神经系统功能紊乱为特征的疫病的病原体之一[3-4]。根据国际病毒分类委员会(ICTV)的最新分类,肠道病毒属共含有12个肠道病毒种(A~L)及3个鼻病毒种(A~C),其中EV-E和EV-F主要感染牛,EV-G主要感染猪[5]。CEV作为新发现的病原体,目前被列为G种肠道病毒(EV-G)[6]。本实验室在国际上首次分离出的CEV-JL14毒株被ICTV收录为 EV-G20 的参考毒株[7]。由于CEV为新发疫病,有关其诊断与检测方法研究较少,虽然目前检测CEV的方法有病毒分离、电镜观察和夹心ELISA方法,这些方法均有其各自的优缺点以及适用性[8],但不适用于临床样品的快速检测。因此急需建立一种具有快速、简便、特异性好、灵敏度高、易操作等特点的检测手段,便于对临床样品进行快速检测。本研究针对严重危害养羊业发展的新发CEV感染,建立了一种特异、敏感、快速、操作简便且便于应用于临床样品检测的RT-PCR检测方法,为CEV感染的诊断提供有效的技术手段。……
