陈白烨 陈敏健 王学明 宋湧 汪怡 袁晓野

福建省妇幼保健院整形外科，福州 350000

细胞焦亡是一种程序性细胞炎性死亡方式，各种刺激因子导致细胞半胱天冬酶-1（caspase-1）激活，一方面引起细胞膜破裂并释放细胞内容物，进而激活炎性反应；另一方面促进白细胞介素（IL）-1β和IL-18的成熟及分泌，进而介导炎性反应［1］。而大量研究表明，炎症是影响创面愈合的重要因素［2-3］，但细胞焦亡在创面愈合中的作用极少见报道，因此，在本研究中我们将探讨皮肤成纤维细胞焦亡在创面愈合中的作用。

我们以往研究证实虎杖苷可以促进大鼠创面愈合［4］，但机制不清。有研究证实，虎杖苷可以抑制脓毒症急性肾损伤中肾小管上皮细胞NLRP3（NACHT，LRR，and PYD domain-containing protein 3）炎性小体激活［5］，而NLRP3激活是诱导细胞焦亡的重要因子［6］。本研究推测虎杖苷可能通过抑制皮肤成纤维细胞焦亡促进创面愈合。

1 材料与方法

1.1 主要材料及试剂 人皮肤成纤维细胞购于上海赛佰慷生物科技有限公司；四甲基偶氮唑蓝（MTT）细胞增殖检测试剂盒购于上海碧云天生物科技有限公司。Ⅲ型胶原蛋白试剂盒购于美国ADL公司；caspase-1活性检测试剂盒购于英国Abcam公司；IL-1β及IL-18酶联免疫吸附试验（ELISA）试剂盒购于Abclonal生物科技有限公司；虎杖苷及Belnacasan（VX-765）购于美国Sigma公司。

1.2 细胞培养及分组 人皮肤成纤维细胞接种于含10%胎牛血清的DMEM培养基中，在37℃及5%CO2下培养，待细胞生长至融合度达80%以上后传代。参照参考文献［7］，以5μg/ml脂多糖（LPS）刺激人皮肤成纤维细胞建立实验模型，培养72 h后检测相关指标。细胞随机分为4组：对照组细胞接受正常培养处理；……