张 鑫，时冠兰

中国石化江苏油田分公司石油工程技术研究院，江苏扬州225009

生物表面活性剂是由微生物产生的一类具有表面活性的生物大分子物质［1］，能够起到润湿、乳化、分散、降低体系的界面张力的作用［2］，其中最具代表的是脂肽类生物表面活性剂。脂肽分子由亲水的肽键和亲油的脂肪烃链组成［3］，具有分子量小、界面活性高，能够渗入低渗透的油藏、不易堵塞地层的特点，同时具有较强的耐温耐盐性能，所以它的使用范围相当广［4］。目前，对生物表面活性剂的研究主要集中在产生菌的筛选和培养条件优化等方面［5］，而对生物表面活性剂结构及其在不同环境条件下的性能认识不足，更缺乏生物表面活性剂对环境的适应性分析，这影响生物表面活性剂的作用效果和规模化应用。

本文中，笔者对分离得到的脂肽菌株开展鉴定，并对生物表面活性剂相关性能进行评价，分析环境因素对其生长及产量的影响，为微生物采油实际应用提供理论依据。

1 生物表面活性剂制备及结构鉴定

1.1 菌种纯化

将发酵液于LB 平板上进行划线，37 ℃培养24 h 后，挑取优势菌落，于液体LB 培养基中进行培养。培养14 h后，采用新鲜培养液于LB平板上再进行划线，重复上述过程3 次，获得菌种S19 的纯菌株。图1为S19纯化后的菌落图。

图1 纯化后菌落图

1.2 培养基优化

1）碳源。分别用20 g/L 的蔗糖、麦芽糖、葡萄糖等为单一的碳源，其他的培养基成分不变，在37 ℃的摇床培养48 h，培养液通过萃取富集，用高效液相色谱定量分析测定表面活性剂产量，结果见图2。……