江小艳，林旭埜

（1.仲恺农业工程学院动物科技学院，广东广州 510000；2.海泰达生物科技（广州）有限公司，广东广州 510000）

鸽新城疫（Newcastle Disease），俗称鸽瘟，病原属于副黏病毒科、副黏病毒亚科、禽副黏病毒属的禽Ⅰ型副黏病毒（APMV-Ⅰ），RNA 病毒，病毒基因组排列顺序为3'-NP-P-M-F-HN-L-5'，依次编码核衣壳蛋白、磷蛋白、基质蛋白、融合蛋白、血凝素-神经氨酸酶蛋白和大蛋白[1]。PPMV-Ⅰ有血凝活性，中强毒株在体外细胞培养中可在体外成纤维细胞（CEF）中增殖，通过膜融合而感染宿主细胞，出现明显的细胞融合、聚集、死亡脱落等细胞病变（CPE）[2]。本研究对广东省清远市某鸽场里疑似发生鸽瘟的病鸽，采集脑、肝脏、胰脏组织，进行病原分离和鉴定，分析其F、HN 基因的分子特征和基因型，测定各代血凝价及细胞半数感染量，为今后鸽新城疫分子流行病学研究提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 病料

广东省清远市某鸽养殖场发病的美王鸽，具有严重的神经症状，不停扭颈，泻痢，粪便稀薄呈黄绿色。

1.2 主要试剂

Primer Star 酶，pMD19-T质粒（Takara）；0.25%胰蛋白酶消化液（北京索莱宝科技有限公司）；新生牛血清（内蒙古金源康生物工程有限公司）；MEM 干粉（Gibco）；柱式病毒RNA 提取试剂盒（Magen）；反转录试剂盒（艾科瑞）。

1.3 主要仪器

二氧化碳细胞培养箱（Panasonic）；倒置显微镜（广州粤显光学仪器）；PCR 仪器（Biometra）；全自动凝胶成像分析系统（北京赛智创业科技）；全自动家用型孵化器（德州市维谦孵化设备制造厂）：离心机（湖南可成仪器设备有限公司）。

1.4 实验动物

SPF 种蛋（大华农禽蛋有限公司）。

1.5 实验病料

广东省清远市某鸽养殖场发病的美王鸽，具有严重的神经症状，不停扭颈，泻痢，粪便稀薄呈黄绿色。……