焦文强，邢广旭，徐引弟，王 丽，王治方，王克领

(1.河南省农业科学院畜牧兽医研究所，河南 郑州 450002；2.河南省农业科学院动物免疫学重点实验室，河南 郑州 450002；3.河南省畜禽繁育与营养调控重点实验室，河南 郑州 450002)

猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus，PDCoV)于2012年在香港首次报道[1]，目前亚洲的多个国家均有PDCoV的报道[2-4]，在我国，多个省份也都检测到PDCoV，发病率差异较大[5-7]。其临床表现比猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus，PEDV)相对温和，但是不同区域阳性率差异较大，可能是由于PDCoV不断遗传变异导致不同区域的流行毒株毒力差异。猪肠道α冠状病毒(Porcine enteric alphacoronavirus,PEAV)由2个研究团队于2017年报道，其是一种新型Bat-HKU2样冠状病毒[8-9]，死亡率高达90%[10]。

仔猪腹泻是危害养猪业健康发展的重要疫病，目前引起仔猪腹泻病原种类繁多，多种病原混合感染是诱发仔猪腹泻的重要原因。PEDV是当前主要的仔猪腹泻病原，PDCoV和PEAV是近年来新近报道诱发腹泻的病原体，但是目前尚没有报道证明PDCoV、PEAV和PEDV混合感染的情况。因此，对这3种病原混合感染情况进行分析可以确定目前仔猪腹泻中新发病原与现存主要病原在猪群中的流行情况，为腹泻类疾病防控措施提供理论参考。

1 材料与方法

1.1 主要试剂 反转录酶M-MLV、DL2 000 DNA marker、PrimeSTAR Max Premix(2×)高保真酶、DNA纯化回收试剂盒、小量质粒提取试剂盒、pMD20-T simple载体、大肠杆菌JM109感受态细胞均购自宝日医生物技术(北京)有限公司；RNA提取试剂盒，购自QIAGEN公司。

1.2 病料 鉴定为PEDV阳性的腹泻疑似病料(2014—2018年采集于河南、河北、山东、山西、江西等省份)由河南省农业科学院畜牧兽医研究所保存。……