腾召剑，林依丹，周双海，李潭清，张义明，宋勤叶，郑士学

(1.河北农业大学动物医学院 河北省兽医生物技术创新中心，河北 保定 071000；2.北京农学院动物科学技术学院，北京 昌平 102206)

猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3,PCV3)与猪皮炎肾病综合征、多器官炎症以及母猪繁殖障碍等多种病症相关[1-3]。该病毒于2015年首次在美国猪场患多器官炎症的仔猪及患皮炎肾病综合征伴发繁殖障碍症状的母猪与死胎的组织中发现[4-5]，随后在中国、日本、韩国等国家和地区的猪群中检测到了该病毒，不同地区或猪场的感染率在9.6%～52.0%[1,6-7]。此外，在野猪、牛、狗、鹿及蜱等体内也检测到PCV3[8-9]，表明PCV3不仅对全球养猪生产构成了潜在威胁，而且可在家畜、野生动物和节肢动物间循环。

PCV3属于圆环病毒科圆环病毒属成员，基因组全长2 000 bp。与猪圆环病毒2(PCV2)相似，PCV3具有圆环病毒典型的基因组结构和遗传特性，包括3个主要开放阅读框(Open reading frame,ORFs)，即ORF1、ORF2和ORF3[4-5]。其中ORF1较保守，编码复制酶；ORF2容易突变，编码214 aa的衣壳(Capsid,Cap)蛋白，该蛋白是病毒入侵、复制和诱导宿主免疫应答的最重要蛋白，并且与病毒变异密切相关[10-12]；ORF3编码231 aa，其功能不详[5]。目前，对PCV3的致病机制及其编码蛋白的生物学功能了解很少，获取具有良好生物学活性的Cap蛋白对于深入了解PCV3的感染免疫特征及其防治具有重要意义。本试验旨在应用大肠杆菌表达系统，体外表达PCV3-Cap蛋白，分析蛋白的抗原表位及其免疫原性，为PCV3免疫学特性、亚单位疫苗及相关检测方法的研究提供科学依据。

1 材料与方法

1.1 质粒、菌种与实验动物 克隆PCV3-Cap蛋白基因序列的重组质粒(pMD-PCV3-ORF2)，由本实验室构建保存；……