王一新，周晓翠，高 超，赵 鹏，翟少华，冯 宇，李 阳

(1.山东农业大学动物医学院，山东 泰安 271018；2.中国兽医药品监察所，北京 海淀 100081；3.新疆农业大学动物医学学院，新疆 乌鲁木齐 830052；4.中国动物卫生与流行病学中心,山东 青岛 266114)

牛副结核病(Paratuberculosis)是由副结核分枝杆菌(Mycobacteriumparatuberculosis)引起的一种反刍动物慢性消化系统疾病[1]。该病呈世界性分布，副结核分枝杆菌可引起感染牛的产奶量下降、持续性消瘦和顽固性下痢，死亡率可达2%～10%，给我国养牛业带来了巨大经济损失。大量研究表明，人的克罗恩病与副结核分枝杆菌感染有关，可能是由于奶的巴氏消毒法不能够完全杀灭该菌，且研究中发现44%的奶制品中都检出副结核分枝杆菌为阳性。近年来该病逐渐引起世界各个国家的广泛关注[2-3]。鉴于副结核病对畜牧养殖业和公共卫生安全的潜在威胁，该病被国际动物卫生组织(OIE)列为必须通报的疫病，我国亦将其列为二类动物性传染病。

尽早发现感染的动物并进行种群净化是防控牛副结核病的主要措施[4]。目前，常用于副结核分枝杆菌诊断的方法主要包括细菌的分离培养、皮下变态反应、IFN-γ释放试验、酶联免疫吸附试验及补体结合试验等[5-7]。然而，这些方法普遍存在操作困难、灵敏度低、敏感性差或检测周期长的缺点，难以满足临床诊断需要。因此，建立准确、高效、实用的副结核分枝杆菌检测技术，对于牛羊等反刍动物副结核病的早期诊断、提高我国畜牧业生产水平具有重要意义。

实时荧光定量PCR方法作为一种快速检测技术，已被广泛应用于兽医传染病的病原诊断中。……