李一鸣，王少林

(中国农业大学动物医学院，北京 海淀 100193)

抗生素是目前临床上治疗感染性疾病的重要武器之一，但随着抗生素在临床及畜禽生产上的重复使用，耐药菌的种类和数量都在逐年上升，临床上不仅出现了多重耐药菌(Multi-drug resistant bacteria，MDR)、广泛耐药菌(Extensively drug resistant，XDR)，还出现了泛耐药菌(Pandrug resistant bacteria，PDR)。一些化合物已经被开发或重新应用于革兰阳性耐药菌的治疗，但有很大的局限性；而革兰阴性多重耐药菌的感染更为可怕，目前临床上还没有可用于这些感染的新药物[1]。多黏菌素是治疗多重耐药革兰阴性菌最重要的药物之一，随着其在人类临床上的广泛运用，多黏菌素耐药基因开始在世界范围内出现，人类临床及兽医临床面临着前所未有的危机和挑战[2]。

目前，多黏菌素耐药基因mcr在世界各地的动物、食物以及人类的肠杆菌科细菌中均有发现，其中包括了北美洲、北非、南洋和欧洲[3-4]。这类耐药基因可以在细菌之间通过质粒传播，加速了多黏菌素耐药基因的传播速度，对人类健康和畜牧业生产造成了严重的威胁，目前急需一种快速检测方法，为未知样品中的mcr基因检测提供依据。相对于传统PCR而言，实时荧光定量PCR具有更高的特异性和敏感性，且操作简便[5-6]。目前，mcr-1/2/3/4/5/8在国内外被多次报道，且具有较高的流行率。本实验室前期已经构建了mcr-1/2/3的实时荧光定量检测方法，而mcr-4/5/8的相关方法还未构建，本试验针对mcr-4/5/8基因建立了相应的实时荧光定量PCR检测方法，以便于对动物以及环境样本中多黏菌素耐药基因进行定性与定量检测。……