孟祥琼，周 娟，陈一博，成若通，俞红贤，3，魏 青，3

(1.青海大学生态环境工程学院，青海 西宁 810016；2.青海大学农牧学院动物医学系，青海 西宁 810016；3.省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室，青海 西宁 810016)

牦牛(Bosgrunniens)是以青藏高原为起源地的特有物种，其对高原环境有良好适应性[1]，早已引起国内外学者的广泛关注，并开展了包括组织形态结构、血氧运输、细胞呼吸代谢以及牦牛适应低氧的分子机制等多方面研究。在发育学方面，研究表明高原牦牛的肺部组织发育比低海拔黄牛快，且高海拔牦牛1日龄时肺泡隔内的毛细血管较为丰富，毛细血管网较黄牛致密，分布也较为广泛，这便于高原牦牛快速适应低氧环境[2-3]。为进一步研究牦牛肺组织发育的分子机制及其与牦牛适应低氧的关系，本试验选取1日龄、30日龄、180日龄和成年牦牛的肺组织为研究对象，通过对其转录组学数据分析，筛选与血管形成相关的基因，并结合其生长发育特点，阐明这些基因的变化规律对牦牛出生后肺组织内血管生长发育的影响，为进一步揭示牦牛低氧适应机制提供理论基础。

1 材料与方法

1.1 试验动物 本试验以青海省海晏县(海拔3 200 m)环湖型牦牛为研究对象，分别取1日龄(HY-1)、30日龄(HY-30)、180日龄(HY-180)及成年牦牛(HY-A)4个发育阶段的肺组织，其中HY-1和HY-A组牦牛各2头，HY-30和HY-180组牦牛各3头。

1.2 试验试剂 TRIzol裂解液、dNTP Mixture、10×PCR Buffer(Mg2+plus)，均购自生工生物工程(上海)股份有限公司；TianScript cDNA、TB Green®PremixExTaqTMⅡ(Tli RNaseH Plus)、TaKaRaExTaq等，均购自TaKaRa生物工程(大连)有限公司。

1.3 试验方法

1.3.1 牦牛肺组织总RNA的提取及……