周惠

（泰州市第三人民医院，江苏 泰州，225300）

目前对于MDPV 药物的检测，主要集中在气相色谱-质谱联用法、液相色谱法等。液相色谱-质谱（LC-MS）技术属于较为先进技术，目前被广泛用于食品、医药等方面。1 次进样后可以获取二级以及三级子离子的全扫描质谱图，定性分析时，获取的化合物结构信息比四级杆质谱多，由此液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用技术已成为代谢物结构分析的常用方法。本次研究主要探讨采用液相色谱-电喷雾离子阱质谱联用技术，构建MDPV 药物代谢产物的鉴定方法，对于代谢动力学、病毒学等方面均具有一定指导意义。

1 资料与方法

1.1 样品来源检测样品为亚甲基二氧吡咯戊酮（MDPV），来源于安徽省公安厅合肥市公安局提供；SD 大鼠，均为雄性。

1.2 试验条件色谱条件：色谱柱（150mm×2.1mm，5μm），流动相为醋酸铵-甲酸缓冲溶液，甲醇为B 为洗脱液，0-1min，10%B，1-6min，10%B-90%B，6-14min，90%B，0.2ml/min，10 μL。质谱条件为电喷雾离子化源、正离子检测，全离子扫描，选择反应监测扫描模式，毛细血管350℃，雾化气30.00L/min，加热辅助气8.00L/min，吹扫气2.00L/min。

1.3 体外代谢与样品处理过程配置MDPV 样品浓度，加入蒸馏水溶液调整样品浓度为50.0μg/ml，制成标准品溶液，获取适量标准品溶液于试管，再加2.0mg/ml 蛋白质溶液的SD 大鼠肝微粒体S9组分KCl-PBS 缓冲溶液，剂量为200μL，混匀，再试管置于水浴锅内进行孵育处理，再予以适量的NADPH KCl-PBS溶液，获取MDPV 孵育体系，MDPV（5.0 μ g/ml）、NADPH（1.0mmol/L）、肝微粒体蛋白质（1.0mmol/L）。将其置于水浴锅孵育，加乙腈，混匀，冰浴，离心，14000r/min，过有机滤膜，采用LC-MS 检测。

2 结果

2.1 构建MDPV 及代谢物的LC-MS 方法优化实验条件下MDPV分析的LC-MS 图谱，见图1。……