罗珍珍 张存旭 朱景乐 王 敏 张艳婷

（1. 西北农林科技大学林学院，陕西 杨凌 712100；2. 国家林业和草原局泡桐研究开发中心，河南 郑州 450003）

栓皮栎（Quercus variabilis）属于壳斗科（Fagaceae）栎属，是我国特有的落叶乔木，广泛分布于华北、华南、西南地区。除了能进行木材、薪材、食用菌、天麻、橡子、栲胶生产外，树皮木栓层剥取后还可制软木，是我国最主要的软木资源树种，具有重要的生态价值和经济价值[1]。近年来，由于栓皮栎林受到环境影响、人为破坏以及病虫危害导致生产力下降。林木遗传改良是提高生产力和抗病虫害能力的重要途径，然而栓皮栎种子繁殖周期长，常规无性繁殖生根困难，这已成为该树种遗传改良的限制因子。

随着现代生物技术的发展，人们已将植物基因工程和常规育种相结合，以便加快遗传改良的进程。其中，农杆菌介导的遗传转化是植物转基因强有力的生物技术工具。以植物器官发生作为转化受体系统，国内外已先后在蓝桉（Eucalyptus globulus）[2]、杨树（Populus alba×P. berolinensis和Populus davidiana×P. bolleana）[3]、马尾松（Pinus massoniana）[4]等树种上得到转化植株。用体胚发生作为转化受体系统在辐射松（Pinus radiate）[5]、扁柏（Chamaecyparis obtusa）[6]、核桃（Juglans hindsii‘Rawlins’×Juglans regia）[7]等树种实现了遗传转化。

GUS基因（β-glucuronidase）和hptII基因（hygromycin phosphotransferase II gene）是遗传转化中常用到的报告基因和标记基因。GUS基因编码β-葡糖醛酸酶，β-葡糖醛酸酶作用于X-Gluc的产物经过氧化形成不溶解的蓝色物质，使具有GUS活性的部位呈现蓝色，常依据此原理检测目的基因的转入[8]。hptII基因编码潮霉素磷酸转移酶，转移到植物细胞后可赋予对潮霉素的抗性，用于抗性组织的筛选[9]。……