熊 兰，周晓榕，刘 丹，刘国晨

空军军医大学第二附属医院 疼痛科 (西安 710038)

内质网是真核细胞内参与物质运输、代谢与蛋白质合成等调控的重要场所[1]。越来越多的研究[2]表明，各种原因导致的细胞内质网应激与肿瘤的发生发展密切相关。内质网核糖体结合蛋白1(endoplasmic reticulum ribosome-binding protein 1，RRBP1)是内质网膜上参与内质网非蛋白折叠反应的重要蛋白之一，既往在结肠癌[3]、肺癌[4]、乳腺癌[5]等多种恶性肿瘤中证实了RRBP1表达的异常上调，但目前RRBP1在肝癌中的表达模式及生物学作用尚不十分清楚。本研究分别用基于TCGA公共数据库的生物信息学分析与免疫组化实验，分析RRBP1在肝癌尤其是转移性肝癌中的表达变化，并进一步通过体外细胞迁移与侵袭实验分析RRBP1在肝癌转移中的调控作用。

1 材料和方法

1.1 材料

肝癌HLF细胞购买自日本癌症研究资源库(Japanese cancer research resources bank， JCRRB)细胞库，细胞培养用加入10%血清的DMEM培养液，培养箱内温度设定为37 ℃，CO2浓度设定为5%。RNA提取试剂盒、RNA反转录试剂盒、荧光定量PCR反应96孔板、PCR试剂与PCR引物均购自上海生工生物公司。Transwell小室购自美国Corning公司，基质胶购自美国BD公司，所有抗体均购自武汉三鹰生物公司。

1.2 方法

1.2.1 RRBP1表达的生物信息分析 利用基于癌症基因组图谱(the cancer genome atlas，TCGA)的在线肿瘤基因表达分析工具UALCAN[6]，对RRBP1在正常肝组织、未转移肝癌组织与转移肝癌组织中的表达进行分析。

1.2.2 免疫组化实验 选取2012～2019年空军军医大学第二附属医院(唐都医院)普外科收集的36对肝癌原发灶与转移灶组织，组织依次经4%多聚甲醛固定、石蜡包埋与切片后，进行免疫组化染色。……