王秋华，许元龙，王璐璐，张卫风

(华东交通大学 土木建筑学院，江西 南昌 330013)

饮用水输布过程中，微生物会利用水中营养物质生长繁殖，形成的生物膜会保护致病菌，严重威胁饮用水安全[1]。ATP荧光检测法作为水中细菌含量的主要评价方法[2-6]，具有快速、廉价、操作简单，且可在低水平下检测(浓度为1 ng/L的ATP不需浓缩，可直接检测)的优势，因而具有广阔的应用前景[7-9]。Van等采用ATP、AOC等多个指标测定慢沙过滤后成品水的微生物生长潜力，发现ATP与AOC相关性良好[10]。

本文主要研究了发光反应条件、水质条件和试剂存放条件对测试结果的影响，以期可更好地利用ATP发光检测技术确定饮用水的生物稳定性。

1 实验部分

1.1 材料与仪器

FeSO4、K2HPO4、KH2PO4、MgSO4·7H2O、(NH4)2SO4、NaCl、NaAc·3H2O均为分析纯；螺旋菌NOX(Spirillumsp.)，购自北纳生物微生物菌种保藏中心；ATP可检测试剂，由BacTiter-GloTMBuffer和BacTiter-GloTMSubstrate的混合液组成；GLOMAXTM20/20检测试剂，购自 Promega 公司。

GLOMAXTM20/20发光检测仪。

1.2 实验方法

1.2.1 2 000 μg/L碳当量培养液的配制 2 000 μg/L碳当量的培养液配方见表1。按照配方溶解药品，并定容到1 L。将培养液分装到200 mL的锥形瓶中，每瓶10 mL，在115 ℃灭菌20 min。

表1 2 000 μg/L碳当量的培养液配方

1.2.2 细菌培养液制备 将NOX菌落接种到 2 000 μg/L 碳当量的培养液中，37 ℃恒温培养 16 d，低温4 ℃冷藏保存3个月，作为细菌培养液。

1.2.3 实验方法 利用GLOMAXTM20/20发光检测仪测试ATP指标。测试结果有两种表达方式。其中一种方式是ATP产生的荧光相对发光强度RLU；另一种方式是通过测试已知量的ATP标样的相对发光强度，将测试样发光强度转换成ATP物质的量(nmol/L)。本文采用RLU值表示ATP。

1.2.3.1 常规检测方法 室温条件下，按照说明要求将BacTiter-GloTMBuffer和BacTiter-GloTMSubstrate两种测试试剂混合。……