张雨阳，魏有海，郭良芝，程 亮，朱海霞，郭青云

（青海大学农林科学院，青海省农业有害生物综合治理重点实验室，青海 西宁 810016）

植物病害是降低农业生产能力的因素之一，其中植物病原真菌可以引起叶斑病、穗腐病、根腐病、霉变、种子变色等严重病害，造成严重的经济损失；不仅如此，有些植物病原真菌也会导致人畜疾病[1-2]。使用化学药剂防治植物病害会引起很多副作用，因此生物防治由于副作用小而逐渐成为农业生产的发展新趋势。链霉菌具备宽泛的抗菌能力，可以产出多种活性物质，如植物激素、抗生素等。这些物质不仅可以增加植物的抗逆性和抗病性，还可作为生物农药进行开发利用[3-4]。以求进一步将该菌株得用于试剂生产，在差别条件下对该菌株发酵液的抗菌活性和稳定性进行研究，为后续开发该菌株作为生物农药提供参考。

1 材料与方法

1.1 供试菌株及培养基

青海省农业害虫综合治理重点实验室保存黄三素链霉菌15-6和12种病原菌。

Gao’s No.1培养基：可溶性淀粉 20.0 g，KNO30.5 g，K2HPO41.0 g，MgSO4·7H2O 0.5 g，NaCl 0.5 g，FeSO4·7H2O 0.01 g，蒸馏水1 L，pH值7.4～7.6。

马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）：马铃薯 200 g,葡萄糖20 g，琼脂20 g，蒸馏水1 L，自然pH值。

1.2 链霉菌15-6无菌发酵液的制备

将活化菌株15-6接种于Gao’s No.1发酵培养基，以180 r/min在28℃条件下利用摇床摇匀，恒温条件下培育5 d， 收集发酵液，将发酵液以10 000 r/min的速度离心30 min，收集上清液，用0.22 μm 滤膜过滤，制备无菌发酵滤液完成。

1.3 抑菌谱测定采用生长速率法

取菌株15-6无菌发酵滤液1 mL加入到直径9 mm的培养皿中，与冷却至 50 ℃的9 mL PDA 培养基混匀制成带毒平板，用无菌打孔器打取5种病原菌菌饼（直径为 5 mm），菌苔向下放置于带毒平板的中央，以无菌水与PDA制成的平板为对照。……