李 敏，江泽斌，郑付春

(汕头大学医学院第一附属医院，广东 汕头 515041)

微RNA(miRNA)是一类内源性的非编码小RNA分子，也是最大的基因家族之一[1]。1993年，第一个miRNA lin-4被发现参与线虫发育的调控[2]，随后的20年间，成千上万种miRNAs在动植物以及人体内被相继发现。miRNA的产生主要分为两个阶段：miRNA初级转录产物在细胞核中被核糖核酸酶Drosha处理成一个约70个核苷酸长度的前体mRNA；之后在转运蛋白exportin-5的作用下被转移到胞质内，进而被Dicer酶切割成长约22个核苷酸的成熟miRNA。成熟miRNA可以与细胞内的Argonaute蛋白等结合形成miRNA诱导的沉默复合体，与靶基因的3′-UTR区域特异性结合，引起靶基因mRNA的降解或翻译抑制。人体中的miRNAs参与约30%基因的表达调控，与整个生命活动密切相关[3]。多个miRNA能同时调控同一个代谢酶，一个miRNA也能同时调控多种代谢酶。尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶(uridine diphosphate-glucuronyl transferase，UGT)是一类重要的Ⅱ相代谢酶，可以在内源物和外源物分子上加入一个葡萄糖醛酸基团，增加极性，利于其经尿液与胆汁排泄，从而调节体内稳态。UGT2B7是UGT家族中重要的一员。本课题组前期研究发现，miR-376b-3p与癫痫患者丙戊酸钠血药浓度有相关性，从丙戊酸钠的代谢酶中筛选出UGT2B7能被miR-376b-3p调控，且UGT2B7在丙戊酸钠的主要代谢途径中所占比例最高。本研究探讨miR-376b-3p对HepG2细胞UGT2B7的调控作用。

1 材料与方法

1.1 主要材料与仪器

HepG2细胞(广州赛库生物技术有限公司)，HEK293T细胞由牛永东老师馈赠，miR-376b-3p模拟物及阴性对照、miR-376b-3p抑制剂及阴性对照(上海诚鑫生物科技有限公司)，UGT2B7抗体(武汉三鹰生物技术有限公……