徐志龙，尹雅洁，夏 险，梁运祥，赵述淼，胡远亮*

(1. 湖北师范大学生命科学学院，食用野生植物保育与利用湖北省重点实验室，黄石 435002；2. 华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，武汉 430070)

角蛋白是一种硬质蛋白，在羊毛、羽毛和指甲等物质中含量丰富[1]，比如在禽类羽毛中粗蛋白的含量高达90%，其中主要为角蛋白[2]。这些物质通常是农产品加工副产物，无害化处理需要大量的资金投入。若有适宜的方法水解利用这些废弃蛋白资源，以代替畜禽日粮中价格昂贵的动物性蛋白原料，如鱼粉或肉粉等，将产生巨大的经济效益[3-5]。

角蛋白分子内和分子间存在大量的二硫键，其结构稳定，能抵抗大多数常见蛋白水解酶，如胃蛋白酶、胰蛋白酶和木瓜蛋白酶的降解作用[6]。采用传统的物理化学方法，高温、高压、强酸及强碱，不仅浪费大量的能源，增加环境负担，而且破坏氨基酸的生物学活性，大大降低了羽毛蛋白质资源的利用效率。

因此，筛选高效角蛋白降解菌，研究其所产角蛋白酶的性质，对羽毛粉资源化利用具有重要意义。本研究以羽毛粉为唯一碳氮源，从土壤环境中筛选高产角蛋白酶菌株，并对其酶学性质进行研究，为利用微生物发酵技术开发羽毛角蛋白饲料资源奠定基础。

1 材料与方法

1.1 土壤样品

从富含羽毛质的环境中采集土壤样品，3份样品分别采自江西省宜春市张巷镇、湖北省武汉市某家禽厂和咸宁市某家禽厂。

1.2 培养基

Luria-Bertani (LB)培养基：胰蛋白胨10 g⋅L-1，酵母提取物5 g⋅L-1，氯化钠10 g⋅L-1，pH 7.5，121 ℃灭菌、30 min。……