王林青，樊 霖，赵 宇，田润博，崔建涛，韩昊莹，赵 丽，陈红英,3*

(1. 郑州师范学院分子生物学郑州市重点实验室，郑州 450044；2. 河南农业大学动物医学院，郑州 450002；3. 郑州市猪重大疫病防控重点实验室，郑州450002；4. 河南牧业经济学院动物医药学院， 郑州 450008)

猪圆环病毒（Porcine circovirus，PCV）是一种呈球形、无囊膜且单股闭合环状DNA病毒，属于圆环病毒科圆环病毒属，为目前已知的最小的动物病毒[1]。在全球范围的猪群中，迄今发现PCV有3个血清型：猪圆环病毒1型、2型和3型（PCV1、PCV2和PCV3）。PCV1于1974年首次被发现存在于猪肾细胞PK-15中，但不产生细胞病变[2]，且对猪无致病性[3]。而PCV2于1997年首次被报道，能够引起猪发生包括仔猪断奶后多系统衰竭综合征（PMWS）、猪皮炎与肾病综合征（PDNS）和繁殖障碍等猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）[4-6]，给世界养猪业造成了巨大的经济损失。

2016年，美国Palinski等[7]和Phan等[8]分别从患有PDNS、繁殖障碍的母猪和关节肿胀和消瘦等疾病的母猪或仔猪检测到PCV3。PCV3基因组为2 000个碱基，与PCV2相似，含有2个主要的开放阅读框（ORF1和ORF2），分别编码rep和cap蛋白。PCV2和PCV3临床表现相似且难以区分，并且常以单独或混合感染的方式感染猪[9]，使我国乃至世界养猪业面临巨大的挑战。因此，建立一种能同时检测和鉴别PCV2和PCV3的方法，为提供有价值的流行病学信息以及启动适当的预防和控制策略至关重要。

荧光定量PCR作为一种新技术，因其与普通PCR相比，具有更加快速、敏感、特异性强和自动化程度高等特点而不断发展，并广泛地应用于生命科学研究的各个领域。因此，本试验根据GenBank中已发表的PCV2和PCV3基因组核苷酸序列，分别设计了2对特异性引物，在同一个PCR反应管中进行两种病原的荧光定量检测，旨在为同时检测和鉴别两种病原提供一种新方法。……