张伊动，马 香，李 宏，唐鸿倩，刘 柱，唐燕琼

（海南大学 生命科学与药学院，海口 570228）

维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）是一种革兰氏阴性兼性厌氧菌，隶属于气单胞菌科、气单胞菌属[1]。有研究表明，这种新兴的水生病原菌可以引起人类和动物（包括水生动物）的腹泻、伤口感染和出血性败血症[2−3]。它兼具肠毒素、Ⅲ型分泌效应蛋白AexU、组氨酸激酶BvgS、丝氨酸蛋白酶、外膜蛋白和鞭毛等多种毒力因子[4−5]，能给水产养殖业造成巨大的经济损失，并对食品安全造成威胁[6−7]。例如：养殖场的鲶鱼和黄颡鱼感染维氏气单胞菌后，会大量死亡[8−9]。因此，维氏气单胞菌引起的鱼类细菌性疾病是制约水产养殖发展的重要因素，而解构维氏气单胞菌的抗逆性对维氏气单胞菌的疾病防治具有重要意义。类CysB蛋白Cbl（CysB like protein）是LysR家族的转录调控因子。1995年，首次在大肠杆菌中发现了cbl基因，它与cys调控子的转录调控因子CysB蛋白非常相似，与CysB具有40%的氨基酸序列同源性[10]。在硫代谢中，Cbl作为细胞内硫酸盐水平的传感器，在体内和体外激活tau和ssu启动子，控制牛磺酸和脂肪族磺酸盐的转运及脱硫所需的tauABCD和ssuEADCB的转录，从而稳定细菌体内的硫酸盐水平[11−13]。Cbl的功能与CysB高度同一，目前对Cbl的研究较少，但鉴于CysB现有的功能，可以推断Cbl存在的潜在毒力控制、参与细菌体内氧化应激机制等重要功能[14−16]。因此，本研究以维氏气单胞菌为研究对象，对Cbl蛋白进行原核表达和纯化，旨在为进一步揭示Cbl蛋白的功能和机制奠定基础。

1 材料与方法

1.1 材料维氏气单胞菌（Aeromonas veronii）C4菌株、大肠杆菌BL21（DE3）以及含pET-28a质粒的大肠杆菌DH5α均为课题组保存菌株。……