刘迪 张秀梅

结肠癌是常见的易发于结直肠部位的消化道恶性肿瘤。近年来，中国结肠癌的发病率和病死率均呈上升趋势[1]，严重威胁着人们的生命健康。异常的代谢模式是恶性肿瘤的一个重要特征，有氧糖酵解已被确认为肿瘤细胞的主要代谢特征[2]，其为肿瘤细胞的生长提供原料和能量。SIRT5 是Sirtuin 家族的一员，主要定位于线粒体基质中，具有不同的去乙酰化酶活性、去琥珀酰化、去戊二酰基化和去丙二酰基化的催化活性，可诱导糖酵解和葡萄糖有氧氧化增加[3]。戊糖磷酸途径（pentose phosphate pathway，PPP）是糖酵解支路，因此该途径流量和速度的改变直接影响糖酵解。葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）存在于胞质中，是PPP 的限速酶，其代谢产物NADPH 和5-磷酸核糖是维持肿瘤细胞生长增殖所必需的物质。目前尚鲜见关于SIRT5 对结肠癌细胞糖代谢、生长增殖的报道及其中可能的分子机制。本研究旨在检测SIRT5 与G6-PD 在结肠癌临床样本中的表达水平，探讨SIRT5 对结肠癌细胞糖代谢、增殖的影响以及该机制是否通过调控G6PD 实现，从而为临床治疗结肠癌提供新的实验依据。

1 材料与方法

1.1 材料及主要试剂

HCT116 和HT29 人结肠癌细胞系由锦州医科大学基础医学院生物化学与分子生物学教研室提供。结肠癌组织切片（包括癌组织和癌旁组织）由中国医科大学附属第一医院病理科提供。SIRT5 干扰RNA 购自上海吉玛公司，SIRT5 质粒购自武汉淼灵生物科技有限公司；葡萄糖氧化酶试剂盒购自北京索莱宝科技有限公司；乳酸测试盒购自南京建成生物公司；……