●张红利 （天水市果树研究所 甘肃 天水 741000）

植物组织脱毒快繁技术已广泛应用于科研和生产，在果树花卉苗木快繁、无病毒苗木培育、代谢物质生产以及植物新品种培育和改良上发挥着重要作用。植物组培发展至今，已经奠定了深厚的理论和实践基础，但仍存在一些技术问题，如组培瓶苗生产过程中的污染，在试管苗工厂化简化生产中对组培成本有着较大的影响。在植物组培实验室培养条件下，对污染菌的发生种类及生长速度进行了调查，并分析产生的原因，为植物组织培养污染防控提供一定的理论依据。

1 材料与方法

1.1 调查地点及条件

调查于2019年在天水市果树研究所植物组培实验室进行。实验室内冬季有暖气，其余季节为自然室温，室内周年温度在18～32 ℃，最高温度在5～7月。实验室严格按照组培操作管理制度，进行培养基灭菌、组培材料超净工作台无菌转接，接种室、培养室用75%酒精喷洒1次/d，每周用必洁士（二氧化氯）熏蒸1次。

1.2 调查材料

调查材料选择实验室大量生产的苹果砧木珠美海棠试管苗。每月取100瓶扩繁试管苗，调查污染菌种类和各污染菌的发生数量，计算各污染菌的发生率和整体污染率。

1.3 污染菌的生长测定

使用珠美海棠扩繁培养基，对产生的污染菌进行分离纯化，测定各污染菌的生长速度。将培养基表面出现黏液状菌斑的污染菌认定为细菌；在培养基上出现绒毛状菌丝，然后形成不同颜色孢子层症状的认定为真菌。……