刘柳影（广东省普宁市疾病预防控制中心,广东 普宁 515300）

水是人体所需必不可少的一部分，维持人类正常生活所需。水的含量在人体中可达到70%以上，对人体起着重要作用，水调节着人体血液循环、新陈代谢以及酸碱平衡。对于地球上的其他生物而言，水也是不可或缺的[1]。由于水具有流动性，局部地区水源污染会导致其他地方的水污染，而水污染的扩散又影响着人们正常的生产生活。所以，水中微生物安全检验显得十分重要。目前，我国饮用水的处理方法有过滤、沉淀、添加氯进行再处理[2]，这些处理方法可以有效减少水污染中的杂质和沉淀物，但是水中微生物含量还需要进一步检验。现对2019年1-12月收集的400份饮用水样品和未处理的水样采取回顾性分析，比较多管发酵检验和滤膜检验方法的检验结果，详细报告如下。

1 一般资料和方法

1.1 一般资料 将2019年1-12月从不同水厂收集的生活饮用水和未处理水样400份作为本次研究对象，每份饮用水各100mL，生活饮用水200份，未处理用水200份，分别用滤膜检验和多管发酵检验方法检验水样细菌情况，对比两组检查方法检查水样中细菌情况和水样合格率情况。

1.2 方法

1.2.1 滤膜检验 准备检测用品：试剂（乳糖蛋白）、镊子、过滤仪器、培养基（品红亚硫酸钠）。将待检测生活饮用水放入到微孔滤膜中进行过滤，微孔滤膜孔径0.45微米，再将过滤完毕的滤膜纸放置在含有乳糖的培养基上进行培养，培养温度37℃，培养时间2d。具体操作方法：首先，将生活饮用水样本进行杀菌处理，用无菌镊子将过滤完毕的滤膜放置在装有蒸馏水的烧杯中，蒸馏水煮至沸腾，进行3次沸煮，每次时间15min，将前两次煮沸后的水及时清理，避免留下残留物，保证被测样本无其他杂质干扰。其次，样本过滤，用无菌镊子夹住滤膜放置于仪器的无菌滤床上，滤膜粗糙的一面放置在上方，加固过滤器，将100mL生活饮用水放入过滤器，打开闸门，气压0.05设定，进行抽滤。最后，将过滤完毕的滤膜取出，无菌镊子夹住滤膜边缘，保证被测菌落的完整性，放置入含有品红硫酸钠的培养皿中，滤膜平整放入培养皿中，避免气泡产生，培养皿倒置放入设定恒温37℃的培养箱中，培养时间2d左右。检验完生活饮用水水样后，再对未处理的水样进行滤膜检验，按照上述步骤进行。

1.2.2 多管发酵检验 准备检测用品：培养皿、天平、载玻片、显微镜、导管、分度吸管。多管发酵检验原理，大肠杆菌经过放置发酵产生酸和气体，按照其原理进行检验试验。具体操作如下，取1mL水样分别放于10mL的单料乳糖蛋白胨和9mL的生理盐水中，充分混匀后各自取出1mL分别放入5份稀释浓度不同的水样中。再从不同浓度的水样中取出1mL分别接种到双料培养基上放入培养箱，温度35℃-37℃，时间2天。判定标准，培养过程中，如果未出现酸和气体，则样品中大肠杆菌为阴性；如果产生酸和气体，则大肠杆菌为阳性，还需将样品再检验。将样品放置在伊红美蓝琼脂板上放入培养箱，温度35℃-37℃，时间在1d内，不低于18h，定时观察琼脂板情况，将菌落完整的琼脂板进行革兰氏染色，用显微镜观察琼脂板。生活用水水样检验完毕后，再对未处理水样进行多管发酵检验，操作步骤如上所述。

1.2.3 微生物检测评价标准 我国现行饮用水标准规定细菌总数在100个/mL内，因为现在使用的日常用水往往经过物理处理和化学处理后再使用，但是水中还是残存一定数量的细菌菌落数，存在饮用水微生物不达标或者水质较浑浊的现象时，水中大肠杆菌数量不符合既定标准。此外，饮用水处理过程中，还存在其他原因导致处理后的水再次遭受污染，如供水管管壁破裂，或者供水管使用时间较长导致管壁微生物滋生等。所以，对饮用水做好检验和抽查就显得非常重要了。

1.3 观察指标 根据国家饮用水标准，每毫升水细菌总数不超过100个，检测指标有大肠杆菌、杂菌、耐热大肠杆菌、大肠埃希氏菌，计算出检测样本结果，比较两组水样的合格率。

1.4 统计学处理 研究数据运用SPSS20.0软件进行处理，计数资料以n(%)表示，行χ2检验，计量资料以（±s）表示，行t检验，P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组水样检验合格情况比较 对200份生活饮用水检测中，多管发酵检验水样总合格195份，合格率97.5%，而滤膜检验水样总合格169份，合格率84.5%，多管发酵检验合格率显著高于滤膜检验合格率（P＜0.05），具有统计学意义，见表1。

表1 两组水样检验合格率结果

2.2 两组水样中细菌指数比较 在对未处理水样的检测中，多管发酵检验大肠杆菌、杂菌、耐热大肠菌群、大肠埃希菌检出率均显著高于滤膜检验检出率（P＜0.05），具有统计学意义，见表2。

表2 两组水样中细菌检出率结果

3 讨论

生活用水事关民生，通过检验生活用水中的微生物，可判断生活用水合格情况[3-4]，保障用水安全。通过实验中回顾性方法研究，在200份未处理被测样品水中，多管发酵检验检出大肠杆菌174份、杂菌168份、耐热大肠杆菌182份、大肠埃希菌190份，检出率93.5%；而滤膜检验检出大肠杆菌148份、杂菌144份、耐热大肠杆菌158份、大肠埃希菌168份，检出率78%，多管发酵检验细菌菌落检出率显著高于滤膜检验（P＜0.05），有统计学意义。滤膜检验出厂水合格水样69份，管网末梢水合格水样70份，二次供水合格水样30份，总合格水样份数169份，合格率84.5%；而多管发酵检验出厂水合格水样78份，管网末梢水合格水样79份，二次供水合格水样38分，总合格水样195份，合格率97.5%。多管发酵检验总合格率显著高于滤膜检验（P＜0.05），有统计学意义，对比两种方法的检验原理，多管发酵检验将样本水样稀释后进行菌落培养，按照不同的稀释浓度分别进行菌落观察，观察各个稀释度菌落的单位体积数[5]。而滤膜检验将样品水样经过过滤器过滤，把滤膜放置于培养基上进行培养，观察培养基上滤膜大肠杆菌单位体积[6]。两种方法各有优点，多管发酵检验较滤膜检验水样合格率较高，而滤膜检验操作简便，检验结果较快，两种方法均可适用。不过，对比检验结果，未处理的水样检测中，多管发酵检验细菌检出率高于滤膜检验，而生活饮用水检测中，多管发酵检验的水质合格率高于滤膜检验水质合格率。说明多管发酵检验有较高的灵敏度，能够准确检验出细菌菌落，经过多管发酵检验的水样，其合格率较滤膜检验较高。

生活中存在各种细菌，这些细菌以生活用水为载体，人们食用这些细菌含量超标的饮用水容易导致各种疾病滋生。由于细菌引起的各种疾病成为人们研究的重点，水资源的污染，严重影响人们的生命健康。从而加强水质检验尤为重要，涉及公共卫生安全，国家相关部门应加大对水质检验的抽样检查[7]，环保部门加大对水源污染的监管，基层加大对水资源保护的宣传和保护，将水源保护放在首位，减少水源垃圾污染、供水管道破坏污染水源等。全社会共同营造保护水资源，爱护水资源，减少水污染的意识，相关部门加大对生活用水相关知识的科普，定期抽查检验，保障群众用水安全。

综上所述，在水样检验中，多管发酵检验较滤膜检验更好[8-9]，具有较高的细菌检出率，值得推广应用。