基于IRE1α/JNK通路研究苁蓉舒痉颗粒对帕金森病模型大鼠的影响*
2021-09-28黄佩珍唐岚芳刘婷钟佳男林瑶许茜蔡晶
黄佩珍,唐岚芳,刘婷,钟佳男,林瑶,许茜,蔡晶
1.福建中医药大学中西医结合研究院,福建 福州 350122;2.福建中医药大学,福建 福州 350122
帕金森病(parkinson′s disease,PD)是第二大神经退行性疾病,发病人群主要为65岁以上的老年人。中脑黑质-纹状体多巴胺神经细胞的变性坏死,多巴胺递质缺乏和路易小体(lewy bodies,LBs)为其主要病理改变[1-2]。研究表明,内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)在PD发病机制中发挥了关键作用[3-4]。ERS无法逆转时会促进相关凋亡蛋白(基因)的表达,诱导细胞凋亡。研究发现,内质网跨膜蛋白肌醇需求激酶1α(inositol requiring cnzymelα,IRE1α)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)所介导的ERS信号通路可调控细胞凋亡[5-7]。本课题组前期研究发现,苁蓉舒痉颗粒可以改善PD模型大鼠的运动障碍和认识功能[8-9],但其作用机制还未明确。本研究通过观察苁蓉舒痉颗粒对PD模型大鼠脑黑质TH表达及脑额叶皮质IRE1α、p-IRE1α、JNK、P-JNK蛋白表达的影响,探讨其对PD模型大鼠的作用。
1 材料
1.1 动物SPF级雄性SD大鼠45只,8周龄,体质量200~240 g,购自杭州医学院,许可证号:SCXK(浙)2019-0002。饲养于福建中医药大学医学实验中心,使用许可证号:SKYX(闽)2017-0006。饲养条件为室温为20~22℃,相对湿度60%~65%,自动光暗控制。
1.2 药物与试剂苁蓉舒痉颗粒是本课题组已获国家授权的专利(专利号为:2011103028541)(福建中医药大学第三附属人民医院提供,由肉苁蓉、丹参、制黄精、赤芍、牡丹皮等药物组成);葵花油、鱼藤酮(美国Sigma公司,货号分别为:A8007、H8923);β-actin抗体(武汉三鹰生物技术有限公司,批号:66009);IRE1α抗体、p-IRE1α抗体(北京博奥森生物技术有限公司,货号分别为:8680R、AP0878);JNK抗体、p-JNK抗体(美国Abcam公司,货号分别为:ab179461、ab207477);乌拉坦(武汉博士德生物工程有限公司,货号:s11036);……
