尹文东,夏飞燕

临沂市妇幼保健院新生儿疾病筛查中心,山东临沂 276000

葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（glucose-6-phosphate dehydrogenase,G6PD）缺乏症是一种X 染色体不完全显性遗传性红细胞缺陷病,与血管内溶血有关[1]。 其发病机制主要是G6PD 基因突变导致谷胱甘肽还原酶的辅酶生成减少,还原型谷胱甘肽生成减少而不能抵抗氧化损伤,引起溶血性贫血[2]。 目前,全球已鉴定出200多种不同的G6PD 基因型分子异常[3]，我国人群突变类型有 35 余种,且多分布在外显子区[4]。 选取 2016 年5 月—2017 年12 月在鲁东南地区出生的新生儿317 681 例,统计G6PD 缺乏症患病率,检测基因突变类型,为该地区最佳的G6PD 缺乏症筛查及确诊方案提供依据。 通过查阅相关文献,山东省内仅有青岛地区有相关报道[5]。

1 对象与方法

1.1 研究对象

选取在鲁东南地区出生的新生儿共317 681 例,男性171 882 例,女性145 799 例。获得新生儿监护人同意后,进行足底血滤纸干血片的采集。 采集过程按照《新生儿疾病筛查技术规范（2010 版）》进行,血片自然干燥后,最迟不超过5 d,冷链运输至新生儿筛查中心实验室,2～8℃冰箱保存。

1.2 G6PD 酶活性检测

应用Wallac Oy 公司生产的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定试剂盒（荧光分析法）及PE 公司生产的全自动免疫荧光分析仪进行G6PD 酶活性筛查。所有操作按照说明书进行。以G6PD 检测活性＜2.6 U/gHb 判定为阳性标本。

1.3 基因突变检测

1.3.1 基因组DNA 提取 按照厦门致善生物科技有限公司Lab-aid820 核酸提取仪及配套试剂说明书操作。

1.3.2 基因突变分型 采用厦门致善生物科技股份有限公司生产的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变检测试剂盒（荧光PCR 熔解曲线法）对基因组DNA 进行分型。……