王诗琦， 惠小珊， 张金生， 袁书章， 薛 珂

(1.河南中医药大学， 郑州 450046；2.中国中医科学院广安门医院， 北京 100053；3.河南中医药大学第三附属医院， 郑州 450008)

BMSCs是一种具有多向分化潜能的成体干细胞，在临床脑梗死、急性心肌梗死等心脑血管疾病临床移植治疗中取得了一定的疗效。但梗死区微环境缺血缺氧对BMSCs的存活、分化等造成了不利的影响[1]。课题组针对微环境与干细胞的研究已经取得一定进展，进一步探索缺血缺氧微环境对BMSCs的影响，通过中药干预缺血缺氧微环境，提高BMSCs的生存率、分化率，可能对缺血缺氧性心脑血管疾病的治疗有一定的价值和意义。本研究以BMSCs为研究对象，建立缺血缺氧微环境细胞模型，动态观察不同时间点缺血缺氧微环境下BMSCs的状态，探究BMSCs在恶劣微环境下的渐变过程，再给予补肾化瘀生新方含药血清干预，对比缺血缺氧微环境下中药干预后BMSCs发生的变化，为中药复方调控缺血缺氧微环境，提高干细胞生存率，降低ROS损害和凋亡率提供实验依据。本研究经河南中医药大学伦理文员会批准，伦理编号DWLL2018030051。

1 材料

1.1 动物

SPF级SD雄性大鼠30只，体质量(180±10)g，实验动物合格证号SCXK(豫)2015-0005，由郑州大学医学院实验动物中心提供。在河南中医药大学第三附属医院实验动物中心饲养，饲养室内氨浓度<20ppm，通风清洁，明暗周期各12 h，自由摄食和饮水，定期更换垫料。

1.2 药品

补肾化瘀生新方组成：熟地黄12 g，当归12 g，巴戟天10 g，石斛10 g，川芎 15 g，肉桂3 g，甘草3 g，上述药物购于深圳市三九中医药健康产品有限公司。

1.3 主要试剂与仪器

High Glucose DMEM (广州赛业公司，批号RASMX-90011)；1XPBS(北京索莱宝公司，批号P1020)；……