氨氮胁迫下菲律宾蛤仔肝胰腺内参基因的筛选
2021-09-23徐宏超邢荣莲李源美丛明
生态毒理学报 2021年3期
关键词:分析
徐宏超,邢荣莲,李源美,丛明
烟台大学,烟台 264005
过去30年,我国海水养殖规模迅猛发展,产量得到快速增长。其中,海洋软体动物的产量最高,达到海水养殖总产量的72.6%~78.6%,因此成为我国海水养殖产量的主要贡献者[1]。海岸带区域是海洋生物特别是海洋软体动物的重要养殖区域[2],海岸带环境的健康状况与软体动物尤其贝类养殖的健康发展密切相关。随着现代工农业的快速发展和人民生活水平的大幅提高,大量污染物未经过严格的净化处理就排放到环境中,并随着径流进入海洋环境中。由于海岸带位于河流和海洋的交汇处,因此陆源污染导致海岸带的污染状况尤其严重。国家海洋水质质量标准规定,养殖海域非离子氨的限定浓度为0.02 mg·L-1(GB11607—89)。然而,2019年中国生态环境报告显示,入海河流的氨氮浓度范围为0.02~26.4 mg·L-1,平均浓度为0.64 mg·L-1,远远超过养殖区域内海水氨氮的安全浓度[3]。已有研究表明,海洋环境中的氨氮对软体动物的生长发育产生严重影响,但是对其致毒机制还不是很清楚,因此有必要从基因水平对其毒性进行分析研究[4-6]。
实时荧光定量PCR是检测基因表达的重要方法之一,可以很好地反映受试生物体中相关基因表达的变化情况。通常可以选择一个内参基因作为其他基因表达的对照,如果内参基因的表达不稳定或者是不同的实验条件下发生改变,则无法检测其他基因表达的微小变化,甚至可能导致错误的实验结果。因此,为特定的实验目的筛选合适的内参基因非常重要。……
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