补肺健脾益肾方对COPD模型大鼠TLR4/MyD88/NF-κB通路相关因子的影响
2021-09-22文小竹谭光波朴金安韩国
文小竹,谭光波,朴金安(韩国)
(湖南中医药大学研究生院,湖南 长沙 410208)
慢性阻塞性肺疾病(Chronic obstructive pulmonary disease,COPD)是呼吸系统的常见病,具有病程长、反复发作的特点,其对肺功能及肺组织造成不可逆的损伤,并给患者及其家庭带来沉重负担[1-2]。COPD病因和发病机制目前并未完全阐明,被认为可能与吸烟、生物燃料、空气污染、遗传等因素有关,慢性炎症是其发病机制中的重要环节[3]。Toll样受体4(Toll like receptor 4,TLR4)/髓样分化因子88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)/核转录因子κB(Nuclear transcription factor-κB,NF-κB)作为炎症反应的经典通路,在COPD发病机制中发挥重要作用[4]。近年来中医药在改善COPD患者耐受性及生活质量方面取得一定效果并受到广泛关注,但鲜有TLR4/MyD88/NF-κB通路相关的研究[5]。本研究对COPD大鼠模型进行不同干预,以TLR4/MyD88/NF-κB通路为切入点,探讨补肺健脾益肾方改善COPD的作用机制。
1 材料与方法
1.1 实验材料
1.1.1 实验动物:清洁级Wistar大鼠40只,雌雄各20只,6~8周龄,体重150~210 g,平均(182.14±15.64)g,均饲养于湖南中医药大学动物实验中心,且未限制每日进水、进食,室温控制在20~24 ℃,湿度为50%,按照动物日节律调节光照,适应性饲养1周后进行实验。
1.1.2 主要仪器与试剂:病理组织包埋机(BM-Ⅱ型,安徽电子科学研究所)、切片机(AO型,德国Leica公司)、显微摄像仪(20486型,日本Olympus公司)、实时荧光定量仪(CFX384Touch型,美国Bio-Rad公司)、离心机(LDZ5-2型,北京京立离心机有限公司)、双光束紫外可见分光光度计(TU-1901型,北京普析通用仪器有限责任公司)、超低温冷冻柜(ULT-1386-3型,美国Revco Value公司),TLR4、MyD88、NF-κB抗体均购自CST公司。
1.2 实验方法
1.2.1 补肺健脾益肾方:黄芪30 g,党参、茯苓、熟地黄各20 g,白术、丹参各15 g,防风、淫羊藿、紫河车、山茱萸、陈皮、法半夏各10 g。……
