王 亚，牛林军，陆 军，曹 威，邵玉宝，鲍兰馨，陈晓宇

结直肠癌是临床常见的恶性肿瘤，2018年我国结直肠癌的发病率、病死率均高于全球平均水平[1]。由于结直肠癌无典型的早期临床症状，且缺乏完善的筛查系统，结直肠癌患者确诊时多数已为晚期，较难获得根治[2]。因此，寻找有特异性诊断价值的肿瘤标志物对结直肠癌患者预后和治疗至关重要[3]。SKA3位于人第13q号染色体上，参与纺锤体和着丝粒形成，调节有丝分裂以及调控细胞增殖和凋亡[4]。据文献报道[5]，SKA3蛋白在结肠癌、乳腺癌和前列腺癌等恶性肿瘤中高表达，并在其发生、发展中起重要作用。研究表明，在肿瘤进展中常伴PI3K/AKT信号通路的改变[6]。有学者提出，PI3K/AKT信号通路的异常激活与结直肠癌的进展有关[7]。本实验采用免疫组化法检测SKA3在结直肠癌中的表达，探讨转染SKA3-siRNA干扰后对结直肠癌细胞SW480增殖、迁徙的影响及PI3K/AKT信号通路中的作用，为发现新的结直肠癌有效药物干预靶点提供依据。

1 材料与方法

1.1 临床资料收集2016年1月～2019年12月安徽省淮北市人民医院行外科手术的69例结直肠癌与对应癌旁组织，患者术前均未接受放、化疗和靶向治疗等，术后均明确诊断为结直肠癌。本实验经安徽省淮北市人民医院伦理委员会批准，患者均签署知情同意书。

1.2 主要试剂与设备siRNA购自上海吉凯基因公司。DMEM高糖培养基、胎牛血清(FBS)、胰蛋白酶，均购自美国Hyclone公司。BCA蛋白浓度测量试剂盒、Lipofectamin 2000，均购自Thermo Scientific公司。一抗羊抗人单克隆抗体SKA3、GAPDH，购自美国Abcam公司。一抗为羊源多克隆抗体AKT、p-AKT、PI3K、p-PI3K，均购自美国Cell Signaling Technology公司。……