郭宁杰，李扬扬，贾真真，崔忠泽，路丽祯，吴淑华

目前，化疗仍然是肿瘤患者术后辅助治疗或姑息治疗的主要方式之一，然而多药耐药性的产生严重影响患者生存期。肿瘤产生耐药性的因素众多，其中最经典的分子机制是7号染色体上多药耐药基因MDR1的过表达，其编码的跨膜糖蛋白(P-gp)可将抗肿瘤药物泵出细胞外，使细胞内药物浓度降低，进而介导肿瘤多药耐药，严重影响临床化疗效果。因此，抑制MDR1蛋白的过表达，有可能成为逆转耐药的新途径。新近研究发现，热休克转录因子1(heat shock factor 1, HSF1)在多种恶性肿瘤中高表达，可促进肿瘤细胞的存活和增殖[1-4]。HSF1可通过结合下游靶基因启动子区的热休克元件，进而促进下游基因的转录，并调控蛋白表达。近年，肿瘤中HSF1与非热休克蛋白表达的关系受到关注[5]。本课题组前期实验结果显示，结直肠癌中HSF1和MDR1具有相关性[6]。本实验采用RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术，通过抑制或过表达HSF1，观察HSF1表达差异对HCT-8/FU细胞株增殖、克隆、侵袭能力及常用化疗药物5-FU、伊立替康耐药性的影响，为抑制结直肠癌的发生、发展并逆转耐药提供新思路。

1 材料与方法

1.1 材料人回盲部结肠腺癌细胞株HCT-8及其耐药细胞株HCT-8/FU购自中国科学院细胞库；胎牛血清和PRMI 1640培养基购自美国Gibco公司；靶向HSF1基因的特异性慢病毒序列、无义序列组慢病毒及转染增强试剂，均由上海吉凯公司设计提供；HSF1、MDR1、Cyclin D1、MMP-2与BCL-2抗体，均购自美国Abcam公司；辣根过氧化物酶标记的羊抗兔多克隆IgG抗体II抗购自福州迈新公司；CCK-8购自日本同仁研究所；……