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牛病毒性腹泻病毒两种基因型双重RT-PCR检测方法的建立及应用

2021-09-15欧云文刘俐君

动物医学进展 2021年9期
关键词:检测方法

王 勤,何 博,欧云文,刘俐君,杨 磊,潘 琴,张 杰

(1.达州职业技术学院,四川达州 635001;2.开江县动物疫病预防控制中心,四川达州 636250;3.中国农业科学院兰州兽医研究所/家畜疫病病原生物学国家重点实验室,甘肃兰州 730046;4.达州市动物疫病预防控制中心,四川达州 635000)

牛病毒性腹泻(Bovine viral diarrhea,BVD)又称黏膜病(Mucosal disease,MD),是由牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)引起的一种急性、热性、高度接触性传染病,BVDV除感染牛外,还可感染猪、羊、鹿以及野生动物,可减少宿主动物外周循环系统和组织内中性粒细胞数量,导致淋巴细胞功能异常,进而机体发生免疫抑制[1]。BVDV感染宿主动物后主要引起腹泻、急慢性黏膜感染、繁殖和免疫障碍,同时伴有其他病原的继发感染与混合感染。怀孕母牛感染后可引起流产和死胎,耐过犊牛则成为持续感染动物(PI),PI牛终生带毒且不断向外排毒,成为BVDV的重要传染源,难以净化[2-3]。目前,该疫病世界范围内流行,流行趋势呈明显上升态势,给养牛业的安全生产带来了严重的挑战,是进出口重点检疫的动物疫病[4-5]。

BVDV为单股正链RNA病毒,属于黄病毒科(Flaviviridae)瘟病毒属(Pestivirus),病毒基因组全长约12 kb~13 kb,由5′端非编码区(5′-UTR)、3′端非编码区(3′-UTR)和1个开放阅读框(ORFs)组成,其中5′-UTR在BVDV不同毒株间具有高度保守性[6-7]。因此,根据5′-UTR的序列差异可将BVDV分为2种基因型,即BVDV-1型和BVDV-2型。我国的主要流行亚型为BVDV-1,近年来相关监测数据表明BVDV-2感染情况逐步增多[8-10]。BVDV-1和BVDV-2之间具有一定交叉保护作用,但无法达到高效保护,BVDV-1疫苗无法对BVDV-2提供完全保护作用,也无法完全抵抗BVDV-2感染[11-13]。……

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