姚婧婷，尤向峰，李明珠，葛 宁，冯学松，刘欣超，顾有方，李文超*

(1.安徽科技学院动物科学学院，安徽凤阳 233100；2.广德市农业农村局，安徽宣城 242200)

鸡球虫病是由艾美耳球虫寄生于鸡肠道引起的一种严重的原虫病，临床上常见多发，可给养鸡造成巨大的经济损失[1]。传统上，不同鸡球虫虫种的鉴定主要依赖于球虫卵囊和孢子囊形态、寄生部位及病变特征等，费时费力，且不能精确区分不同虫种[2]。PCR技术因其具有简便、快速、灵敏度高的优点，已逐渐应用到球虫分类领域。目前，已发展了不少鉴别不同种鸡球虫的PCR方法，常用的靶基因有18S rDNA、5S rDNA、内转录间隔区(internal transcribed spacer 1，ITS，包括ITS-1和 ITS-2)以及特征序列扩增区(sequence characterized amplified regions,SCAR)基因等，其中基于ITS基因的PCR已广泛应用于鸡球虫病的诊断及流行病学调查中[2-4]。

国内有关鸡球虫病流行病学方面的研究较多，但相关研究基本上是采用饱和盐水漂浮粪便，镜检观察卵囊形态进而鉴别感染虫种的传统方法[5]。国内采用分子生物学方法对鸡球虫进行调查的报道不多，目前仅见山东省、浙江省和安徽省有相关报道[6-9]。安徽省是养鸡大省，已有研究显示安徽省鸡球虫感染率较高[8-11]。为弥补相关报道调查地域狭窄等不足，及时反映安徽省鸡群球虫感染状况，采用分子生物学方法对安徽省多地散养鸡群球虫感染情况进行调查，以期为安徽省鸡球虫病防控提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 样品来源 829份新鲜鸡粪便于2017年10月至2018年7月期间分别采集自安徽省滁州市明光市、淮南市凤台县、阜阳市太和县、宿州市埇桥区、六安市金安区、宣城市宁国市的7个散养鸡场。……