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（常州千红生化制药股份有限公司 江苏常州 213125）

1 前言

肝素钠是一种来自猪小肠黏膜中提取的硫酸氨基葡萄糖药物，属粘多糖类物质。作为源自天然成分的抗凝药主要用于防止血栓形成或深静脉血栓的治疗。临床使用中，由于存在发生肝素诱导的血小板减少症（heparin-induced thrombocytopenia，HIT）的风险[1]，会严重威胁患者生命安全，所以对肝素产品免疫原性的评估和管理非常重要。因肝素作为来源于猪等动物的生化药物，可能在肝素原材料如器官采集、切割、初产品加工等前道工序中混入不定量的脂类物质，而脂质作为杂质的一种，可能会作为免疫激动剂增强肝素的免疫原性[2]。因此本文建立一种针对肝素钠中脂质含量的检测方法，并进行方法学验证。

脂质不溶于水，易溶于有机溶剂。测定脂质大多采用低沸点的有机溶剂萃取的方法。常用的溶剂有乙醚，石油醚等。国内外药典（Ch.P.、USP等）中对于脂质的测定，均采用有机溶剂萃取，取有机层，将有机溶剂挥发干后，恒重称量，测得样品中脂质含量。因此，对于肝素中脂质的含量测定，以石油醚为提取剂采用索式提取法提取肝素中脂质后恒重称量的方法能符合肝素中脂质的检测要求。根据中国药典2015版二部附录XIX A《药品质量标准分析方法验证指导原则》、ICH Q2B《Validation of Analytical Procedures：Methodology》以及USP33-NF28<1225>《Validation of Compendial Procedures》对该方法进行范围、准确度、精密度和检测限的验证。

2 方法原理

脂质不溶于水，将经干燥后的供试品用石油醚回流提取，使供试品中的脂质进入溶剂中，蒸去溶剂后所得到的残留物，即为脂质。……