MPN法检验大肠菌群的实验分析
2021-09-15苏章庭曾晓琮刘单单杨丹婷周露
质量安全与检验检测 2021年3期
关键词:实验
苏章庭 曾晓琮 刘单单 杨丹婷 周露
(广东省食品检验所 广东广州 510435)
1 前言
大肠菌群(coliform group、coliform)是指一群需氧及兼性厌氧、能在37℃培养24 h内使乳糖发酵产酸产气的革兰氏阴性、无芽胞杆菌。它基本包括粪便内所有的兼性厌氧、革兰氏阴性的杆菌,典型的菌属包括埃希氏菌属(Escherichia)、柠檬酸杆菌属(Citrobacter)、肠 杆 菌 属(Enterobacter)、克 雷 伯 氏 菌 属(Klebsiella)、哈夫尼菌属(Hafnia)等。但大肠菌群不是分类学上的命名,而仅作为一个工作定义[1-7]。
多管发酵法是根据大肠菌群细菌能发酵乳糖、产酸产气以及具备革兰氏染色阴性、无芽孢、呈杆状等有关特性,通过系列稀释实验与结合概率理论,来估计水样中的总大肠茵群数。在一般的多管发酵实验中,样品需要先经过梯度系列稀释,再取一定体积的水样接种至液体培养基中,每个稀释度通常需要进行多组平行重复实验。然后根据培养过后的阳性管数,通过查阅MPN统计表估计实验结果[8-10]。
多管发酵法的结果以最可能数(Most Probable Number,MPN)来进行表示。实际上是根据统计学理论,估计水体中的大肠菌群密度的一种方法。如果从理论方面考虑,并且进行最大的重复实验,可以发现这种估计有大于实际数字的倾向,但是只要每一稀释度试管重复数目增加,这种差异便会减少。所以对于细菌含量的估计值,大部分取决于那些既显示阳性又显阴性的稀释度。因此,在实验设计时,水样检验所要求的平行实验数目,需根据所要求数据的准确度而定[11]。对于直接饮用的如矿泉水等预计不是严重污染的样品,可以采用单个稀释度作为预实验。……
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