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草鱼Rab1A基因的克隆表达、抗体制备及对微囊藻毒素-LR的响应

2021-09-13阮记明梁惜梅林长高隗黎丽

核农学报 2021年9期
关键词:分析

何 丽 刘 林 阮记明 周 颖 梁惜梅 林长高 隗黎丽

(江西农业大学动物科学技术学院,江西 南昌 330045)

在真核生物中,小分子三磷酸鸟苷(guanosine triphosphate,GTP)结合蛋白家族是一类能够结合GTP的蛋白质,该家族包括Ras、Rho、Rab (ras-associated binding-GTPase)、Sar/Arf 和Ran 5 个亚家族,Rab 是其中最大的亚家族[1],它编码的蛋白质以单体的形式存在,一般由200~210 个氨基酸组成,包含高度保守的GTPase 结构域、GTP/GDP 结合结构域和可变的N 端和C 端[2]。Rab 蛋白不仅对维持正确的细胞稳态至关重要,而且对特定的细胞功能也非常重要[3]。不同的Rabs 蛋白是突触囊泡运输的重要调节因子,在细胞增殖分子或是凋亡中发挥重要作用[4-5]。Rab 蛋白由鸟苷酸交换因子(guanine nucleotide exchange factor,GEFs)激活[6],其活性受到GTP 结合形式(活性状态)和GDP 结合形式(非活性状态)的严格调控[7],激活的Rab 蛋白通过招募外壳蛋白、激酶、磷酸酶等效应分子触发下游膜运输事件[8-9]。

在人类中发现的Rab 蛋白至少有60 种[10],其中,Rab1A 蛋白作为Ras 超家族的一员,最初被描述为高尔基体(Golgi-resident) Rab,参与内质网到高尔基体的运输[11]。有研究表明,Rab1A 蛋白作为分子开关还可调节其他类型的细胞内转运事件,如早期内吞囊泡的运动[12]。Rab1A 蛋白作为一种高度保守的蛋白质,已在158 种不同生物体中被发现[13],但在鱼类中报道较少[14]。草鱼(Ctenopharygodon idella)属鲤形目鲤科,是我国一种重要的淡水养殖鱼类,2018年的总产量达到了5.5×109kg,占淡水养殖鱼类总产量的21.63%[15]。近年来,由于投饵以及养殖密度的增加,极易造成养殖池塘的富营养,从而导致蓝藻水华的暴发,随之释放到水环境中的微囊藻毒素(microcystins,MCs)对草鱼会产生一定的胁迫。……

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