李可维 张宏超 刘海晶 孙莉 张雪

摘要：根据发酵原料药生产要求，对维生素C生产所用的发酵罐进行灭菌工艺验证，通过热分布测试确认发酵罐的温度分布，通过微生物挑战实验确认发酵罐的无菌状态。

关键词：发酵罐 热分布测试 微生物挑战实验

1 引言：

在维生素C发酵生产前需要保持确保空发酵罐的无菌状态，依据制药行业规范和GMP对发酵罐空消灭菌过程实施热分布测试和微生物挑战实验。从而实现发酵过程的无菌纯培养，降低发酵液染菌的风险，保证产品质量和生产效益。

2 GMP发酵罐的主要技术参数

（1）发酵罐工作体积为200m3。

（2）发酵罐由罐体，管路和控制系统组成。

（3）能够准确控制搅拌速度、空气流量和培养温度，能够精确测量温度、pH值和空气流量。

（4）发酵罐为上搅拌发酵罐，采用双端面机械密封，具有良好的密封性能。

（5）无菌空气采用双级过滤器进行除菌过滤，过滤效率高，能够耐受蒸汽灭菌。

（6）罐体和管路均采用304不锈钢制作，接触液体表面经过抛光处理，罐体具有零死角接种阀、取样阀和底阀。

3 实验仪器、耗材

3.1 WL-T1無线温度验证系统

型号 WL-T1通用型

感温元件 PT1000

测量范围 -60℃至150℃

精度 ±0.1℃

分辨率 0.01℃

记录仪材质 316L不锈钢

3.2生物指示剂

生产商：美国3M公司 型号：Attest 1262-S生物指示剂（蒸汽）

D值（121℃）：1.5～3.0分钟 菌种：ATCC7953嗜热脂肪地芽孢杆菌

培养温度：56℃±2℃ 孢子量：1.0×106～9.9×106

Z值：≥6℃ 储存条件：15～30℃，35%～65%RH

3.3可扩展试验箱

设备型号：BXS-250 设备容积：250L

电源电压：220V/50Hz 控温范围：0～70℃

出厂日期：2019年08月20日 出厂编号：190020

生产商：上海博迅实业有限公司医疗设备厂

3.4 高……