李文杰，兰 添，王茂鹏，李一权，尚 超，肖朋朋*，孙文超*，金宁一 *， 李 霄*

(1.温州大学 病毒学研究所，浙江 温州 325000；2.长春中医药大学 吉林省院士工作站，吉林 长春 130122)

癌症是人类死亡的主要病因之一。2020年，全球大约有1 930万例新发癌症病例和近1 000万癌症死亡病例,其中肺癌新发病例大约220万，发病率仅次于乳腺癌居第二位，并且肺癌的死亡率在癌症中排名第一，大约每年有 180 万人因肺癌死亡(18%)[1]。在癌症内部有一部分细胞被称为癌症干细胞，这部分细胞在癌症起始、治疗抵抗、转移和复发中起关键作用[2]。这意味着，以肺癌干细胞为靶标可能是根除肺癌的有效治疗策略。靶向杀伤癌症干细胞可能有助于开发针对癌症的新型治疗策略，在治疗癌症时可能具有临床优势。

本课题组前期构建了对肿瘤细胞具有特异性杀伤作用的重组溶瘤腺病毒Ad-Apoptin-hTERTp-E1a(Ad-VT)[3]，Ad-VT使用肿瘤特异性启动子 hTERTp来诱导其在肿瘤细胞中的特异性复制，同时含有 VP3 基因，表达具有肿瘤特异性杀伤作用的 Apoptin 蛋白，能够同时实现在肿瘤细胞中的特异性复制及对肿瘤细胞的特异性杀伤作用。Ad-Mock 为不含 hTERTp和 Apoptin 基因的腺病毒载体。本研究拟利用课题组前期构建的Ad-VT作用于肺癌干细胞，分析重组溶瘤腺病毒对肺癌干细胞的杀伤作用，探讨Ad-VT对肺癌干细胞的抑制作用。

1 材料与方法

1.1 材料重组溶瘤腺病毒由本实验室构建并保存；人肺癌干细胞A549-CSC由本实验室经磁珠分选所得并保存；CCK-8购自日本同仁；JC-1购自美国 Life 公司； Transwell Permeable Support购自美国 Corning公司；BIOCOAT Matrigel 侵袭小室、Annexin Ⅴ-FITC/PI 试剂盒购自美国 BD 公司。……