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羊源产气荚膜梭菌多重荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

2021-09-13李一鸣张凯悦张彦明姜艳芬

中国兽医学报 2021年8期
关键词:检测

李一鸣,李 丽,2,张凯悦,张彦明*,姜艳芬*

(1.西北农林科技大学 动物医学院,陕西 杨凌 712100;2.威海市文登区人才创新发展中心,山东 威海 264400)

产气荚膜梭菌(Clostridiumperfringens)是一种广泛分布于环境和动物肠道中的革兰阳性厌氧梭状芽孢杆菌,属于条件性致病菌[1-2]。当动物(机体)免疫力下降或环境剧烈变化引起应激时,可造成肠道菌群失调,产气荚膜梭菌迅速繁殖,产生的大量毒素损坏肠黏膜上皮细胞的完整性,使肠道黏膜的通透性增加,细菌和毒素进入血液循环,造成坏死性肠炎和肠毒血症等疾病[3-4]。该菌分为A~G 7个血清型[5],其中A~E型引起羊发病,A型是引起羊“猝死症”的主要原因,产生α毒素;B型是羔羊痢疾和绵羊出血性肠炎的病原,产生α、β和ε毒素;C型引起绵羊、山羊、羔羊等肠毒血症,产生α和β毒素;D型引起山羊、绵羊肠毒血症,产生α和ε毒素;E型主要引起羔羊肠毒血症,产生α和ι毒素,我国目前还没有关于E型菌株分离的报道。

目前,产气荚膜梭菌病已广泛分布于全国各地,以潜伏期短、发病急、死亡快为特点,严重危害中国畜牧业的发展[6-7]。据青海省海北州祁连县绵羊发病死亡情况调查,平均3.9%的病死率中,致死率达到1.7%,接近绵羊发病死亡的50.0%[8]。近些年,随着养羊业不断向着集约化、规模化发展,该种疾病的报告病例呈上升趋势,急需采取有效措施,切实做好防控工作[9]。因此,建立一种快速鉴别诊断方法已迫在眉睫。本研究建立了针对A、B、C、D型羊源产气荚膜梭菌的α、β和ε毒素基因的多重荧光定量 PCR检测方法,定量检测不同型的产气荚膜梭菌,为更好地防控产气荚膜梭菌病,有效降低该类疫病的发病率提供科学支持。……

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