王赛楠，李利杰，赵振超，孙文杰，张世华，何春辉，李新生

(河南农业大学 动物医学院，河南 郑州 450002)

鸡新城疫(Newcastle disease，ND)是由新城疫病毒(Newcastle disease virus，NDV)引起的禽类的一种急性、高度接触性、传染性疫病[1]，其主要症状为高热，精神沉郁，呼吸加快，食欲减退，下痢，以及翅、腿麻痹，运动失调等[2]，该病传播快、发病率和死亡率高，世界动物卫生组织(OIE)将其列为A类动物疫病[3]。自1926年被报道以来，ND在世界范围内广泛传播，伴随着疫苗的广泛应用，ND的毁灭性大流行已基本得到控制[4]，因为缺乏区域性协调的NDV综合防控策略，其在全球主要养鸡地区鸡群仍时有发生。

NDV属于副黏病毒科副黏病毒属的禽副黏病毒Ⅰ型，是具囊膜的负链RNA病毒，仅有1个血清型[5]。ND的确诊常常使用病毒分离鉴定、RT-PCR、血凝试验(HA)和血凝抑制试验(HI)等，但这些方法均难以区分分离到的NDV是流行强毒株还是是弱毒疫苗株[6]。单克隆抗体有潜力作为NDV不同毒株抗原性差异区分的重要鉴别手段[7-8]。区分NDV毒力强弱的常用方法是测定NDV分离毒株的脑内致病指数(ICPI)，结合F2蛋白羧基端113～116位是否含有至少3个精氨酸或者赖氨酸，F1蛋白的第117位是否为苯丙氨酸来进行综合判定[9]。到目前为止，尚未见显著区分NDV强、弱毒单克隆抗体制备和鉴定的报道。本课题组为建立快速区分NDV强毒和弱毒疫苗株病毒的检测方法，进行相关探索和研究。

1 材料与方法

1.1 病毒、实验动物和主要试剂NDV La Sota株(基因Ⅱ型，ICPI=0.3)、F48E9株(基因Ⅸ型，ICPI=2.0)、HN09-68株(基因Ⅶ型，ICPI=1.5)、AIV H9N2亚型X-13株、IBDV C4株、FAdV-4 WZ株、NS0细胞均由河南农业大学鉴定保存；BALB/c小鼠购自郑州大学动物实验中心；……