猪圆环病毒2型和4型双重PCR检测方法的建立
2021-09-10侯承尧田润博崔建涛陈红英
徐 通,侯承尧，田润博,崔建涛,赵 丽，陈红英*
(1.河南农业大学 动物医学院，河南 郑州 450002；2.河南牧业经济学院 动物医药学院，河南 郑州 450046)
猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2,PCV2)属于圆环病毒科圆环病毒属，是迄今为止发现的一种最小的、无囊膜的、单股环状DNA病毒，其全基因组含有1 766～1 779个碱基[1-2]。猪圆环病毒病(PCVAD)是由PCV2引起的一系列疾病的总称，主要包括患断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、仔猪先天性震颤(CT)、猪皮炎和肾病综合征(PDNS)、猪呼吸道疾病综合征(PRDC)以及繁殖障碍疾病[3-6]。自2000年郎洪武等[7]在我国报道PCV2以来，我国猪群PCVAD频发，且死亡率不断增加，给我国养猪业造成了巨大的经济损失。
2019年ZHANG等[8]报道在患有PCVAD的猪中发现了1种新型PCV，命名为猪圆环病毒4型(PCV4)。该病毒的基因组大小为1 770 nt，其结构与PCV2相似，主要编码Cap和Rep2个基因，其中Cap基因为687 nt，编码228个氨基酸；Rep基因为891 nt，编码296个氨基酸。TIAN等[9]从患有严重临床疾病(包括PDNS、腹泻和呼吸道症状)的猪中鉴定出PCV4，表明PCV4与PCVAD密切相关。
PCV2感染可引起猪免疫抑制，临床上经常出现 PCV2 与猪其他病原共感染，使PCVAD的临床表现变得复杂，且发病猪死亡率增加[10-11]。已有多个研究表明临床上PCV4常与PCV2混合感染[8-9]。为了监控PCVAD疫情，急需建立一种快速、准确、操作简单、灵敏和特异的PCV2/4检测方法。目前PCV2和PCV4已有单一PCR检测方法，迄今尚未有同时检测2种病原的方法。因此，本试验建立了一种特异、灵敏且同时检测和鉴别PCV2/4的双重PCR方法，为监测PCV2/4在我国的发生与流行提供分子诊断技术支持，对于PCV2/4的流行病学调查具有重要现实意义。
