表达IBDV VP2蛋白的基因Ⅶ型重组新城疫病毒的构建及鉴定
2021-09-10杜倩茹王楠楠任广彩叶俊贤何献铭刘郁夫陈瑞爱
杜倩茹,王楠楠,任广彩,叶俊贤,罗 琼,3,容 芳,何献铭,王 婷,刘郁夫,,陈瑞爱,*
(1.华南农业大学 兽医学院,广东 广州 510642;2.华农(肇庆)生物产业技术研究院有限公司,广东 肇庆 526238;3.肇庆大华农生物药品有限公司,广东 肇庆 526238)
传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)是一种具有二十面体核衣壳结构的无包膜双链RNA病毒,感染鸡引起急性、高度传染性、免疫抑制性疾病。IBDV超强毒株感染雏鸡,可导致极高死亡率,造成严重经济损失[1-2]。目前国内主要采用低致病力或中等毒力活疫苗免疫雏鸡的方法防控IBDV,但常受母源抗体干扰或流行毒株抗原变异而导致免疫失败,防控效果不佳[3]。
随着反向遗传技术的不断成熟与广泛应用,国内外学者己经证实新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)作为疫苗载体,具有表达外源蛋白的潜力[4]。NDV作为疫苗载体有以下优势:NDV基因组在进行RNA转录时呈现“跳跃”式转录;NDV可在鸡胚中快速高效繁殖,生产成本低;NDV可有效诱导机体产生较强的体液和细胞免疫应答,具有一定的免疫佐剂作用[5]。这些特性使NDV成为理想的病毒载体,但先前NDV载体疫苗研究多以基因Ⅱ型疫苗株LaSota为骨架,以近年来新流行的基因Ⅶ型NDV为载体的报道较少。
IBDV抗原性主要取决于A片段上VP2基因,其编码的VP2蛋白是IBDV主要的结构蛋白,能诱导机体产生中和抗体[6]。因此本研究通过反向遗传技术,以基因Ⅶ型NDV弱毒株为骨架,在NDV基因组P基因和M基因之间的非编码区序列中插入IBDV的VP2基因,获得表达IBDV VP2蛋白的NDV重组病毒,为进一步研发NDV和IBDV新型二联疫苗提供基础。……
