孔 萍，王康嵘，张 静

(1.宜昌市夷陵医院药剂科，宜昌 443100；2.武汉市普仁医院耳鼻喉口腔头颈外科，武汉 430081)

恶性肿瘤是目前导致居民死亡的主要原因之一[1]。近年研究发现，抗原分化簇90(CD90)参与肿瘤细胞增殖、转移、凋亡等过程，可在各种正常组织或细胞中表达并与肿瘤预后密切相关[2]。肿瘤干细胞(CSCs)的存在是肿瘤逆转和恢复的主要原因之一。抗原分化簇133(CD133)为CSCs标志物，Notch为调控CSCs的经典信号通路。研究表明，CD133和Notch1具有致瘤性，且与CSCs肿瘤的发生、转移和耐药有关[3-4]。研究证实，细胞自噬具有促进肿瘤细胞发生和发展的作用，通过抑制细胞自噬可达到抗肿瘤作用[5]。雷帕霉素靶蛋白(mTOR)为细胞自噬的重要调控途径。雷帕霉素是目前临床常用的mTOR受体抑制剂，可通过抑制mTOR活化，促进细胞自噬[6]。本研究观察了雷帕霉素对S180肉瘤细胞和小鼠S180肉瘤模型的抑瘤作用，以及对肿瘤组织CD90、CD133和Notch1蛋白表达的影响，旨在进一步探讨雷帕霉素的抗肿瘤作用机制，为临床抗肿瘤治疗提供参考。

1 仪器与材料

1.1仪器 Multiskan FC型酶标仪和Attune NxT型流式细胞仪，均购自美国赛默飞世尔公司。

1.2材料 小鼠S180肉瘤细胞，上海江林生物科技有限公司；雷帕霉素(批号822178)，北京华迈科生物技术有限责任公司；DMEM完全培养基(批号31600)、磷酸盐缓冲液(PBS，批号P1022)、胰蛋白酶(批号T1320)、CCK-8试剂盒(批号CA1210)、抗荧光衰减封片剂(批号S2100)、HRP标记二抗(批号SE064)、DAB显色试剂盒(批号DA1015)，均购自北京索莱宝科技有限公司；细胞周期检测试剂盒(批号340242)、细胞凋亡检测试剂盒(批号556507)，均购自美国BD公司；冷冻包埋剂(批号6506)、荧光二抗(批号A-11034)，均购自美国赛默飞世尔公司；……