熊云帆，李 琴

(1.云南省第二人民医院眼科，昆明 650021；2.昆明医科大学第一附属医院眼科，昆明 650000)

青光眼是临床常见的眼科疾病，表现为眼压升高、视力损害、视神经受压，其发病机制复杂，临床治疗难度大。沉默信息调节因子相关酶1(SIRT1)治疗青光眼的作用受到日益关注，该分子具有去乙酰化活性，通过调节下游p53和NF-κB等分子的去乙酰化从而发挥抗炎、抗氧化和抗凋亡等作用。在青光眼患者的小梁网组织中，SIRT1的表达明显降低，且与炎症反应、氧化应激反应和细胞凋亡等的激活均密切相关[1-2]。因此，激活SIRT1也被认为是治疗青光眼的理想靶点。白藜芦醇(RES)是从虎杖和葡萄等植物中提取得到的天然多酚类化合物，也是目前已知最强的SIRT1激动剂，激活SIRT1通路后能在肝脏缺血再灌注损伤和视网膜缺血再灌注损伤中发挥保护作用[3-4]。本研究以青光眼大鼠为对象并基于SIRT1通路分析RES对视网膜组织的保护作用。

1 仪器与材料

1.1仪器 Topo-pen AVIA型眼压计，美国Reichert公司；T1600型凝胶成像仪，上海天能公司；ELX808型酶标仪，美国Bio-tek公司。

1.2试药 白藜芦醇(RES)，Sigma公司；水合氯醛，上海抚生实业有限公司；奥布卡因滴眼液，山东博士伦福瑞达制药有限公司；RIPA裂解液，上海碧云天公司；B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、裂解型含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Cleaved caspase-3)、沉默信息调节因子相关酶1(SIRT-1)、乙酰化p53和乙酰化NF-κB的单克隆一抗及HRP二抗，均购自Abcam公司；肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介素-6(IL-6)的酶联免疫吸附(Elisa)试剂盒，均购自上海西唐公司。

1.3动物 30只雄性SD大鼠，8～10周龄，体质量为180～200 g，购自上海灵畅生物科技有限公司，生产许可证号：SCXK(沪)2018-0003。……